JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Biyoloji
0 görüntülenme • 3:02 dk. • April 30th, 2023
- Bir genin işlevini belirlemeye yönelik bir yaklaşım, ifadesini yıkmak ve etkisini gözlemlemektir. Morpholino oligomerleri genellikle zebra balıklarında nakavt çalışmalarında kullanılır. Bir morfolino, hedef gen ekspresyonunu inhibe eden, yaklaşık 25 baz uzunluğunda sentetik DNA benzeri bir moleküldür.
Morfolino tedavisi için, kısmen kesilmiş bir kuyruk yüzgeci olan anestezi uygulanmış bir balığı bir enjeksiyon plakasına yerleştirin ve plakayı stereo mikroskop altına yerleştirin. Enjekte edilmemiş ventral taraf kontrol görevi görürken sadece sırt tarafını enjekte edin. Morpholinos, hedefledikleri diziye bağlı olarak iki şekilde işlev görebilir. İlk olarak, bir mRNA üzerindeki translasyon başlangıç bölgesine birleşirler ve translasyonu bloke ederek protein sentezini önlerler.
İkincisi, bir pre-mRNA üzerindeki intron-ekzon bağlantısına bağlanabilir ve uygun uçbirleştirmeyi önleyebilir, bu da hücre tarafından bozulacak kusurlu bir transkript ile sonuçlanır. Daha sonra, kuyruk yüzgeçlerini büyüme açısından inceleyin. Morfolino ile tedavi edilen ve tedavi edilmeyen bölgelerin yeniden büyümesi arasındaki farklar, hedeflenen proteinin yüzgeç rejenerasyonunda rol oynadığını göstermektedir
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin