JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Biyoloji
0 görüntülenme • 4:28 dk. • April 30th, 2023
- İlk olarak, erimiş agaroza dekoryonlu embriyolara kalsiyum sağlayan E3 ortamı ekleyerek agaroz hazırlayın. Daha sonra, embriyoları uyuşturmak için MS222 ekleyin. Agaroz karışımını katılaşmaya yakın 38 santigrat dereceye kadar soğutun. Floresan proteinleri eksprese eden birkaç dekoryonlu embriyo seçin ve bunları agaroz karışımına aktarın.
Daha sonra, bir cam kılcal damara bir pistonu tamamen yerleştirin ve önce kafasına girdiğinden emin olarak bir embriyo çizin. Agaroz katılaştıktan sonra, kılcal damarı E3 ortamı içeren bir beherde dik tutmak için bant kullanın. Açık kılcal taban, embriyo numunesi için gaz değişimini destekler.
Kılcal damarı bir ışık tabakası floresan mikroskobunun numune tutucusuna yerleştirin. Lazer, kesitsel bir görüntü yakalamak için numuneye dik olarak yerleştirilmiş bir algılama hedefine izin veren ince bir ışık tabakası oluşturur. Örnek protokolde, gelişmekte olan gözü görüntülemek için zebra balığı embriyolarını monte edeceğiz.
Agarozu hazırlamakla başlayın. Hazırlanmış 1 mililitrelik %1 düşük erime noktalı agaroz alikotunu E3 ortamında 70 santigrat derecede eritin. Yaklaşık 15 dakika sonra, 600 mikrolitre erimiş agarozu taze, 1.5 mililitrelik bir tüpe akt
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin