JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Biyoloji
0 görüntülenme • 3:27 dk. • April 30th, 2023
- E3 ortamında embriyo içeren bir Petri kabı ile başlayın. Pigment oluşumunu engellemek için embriyoları ve feniltiouri, PTU çözeltisini uyuşturmak için tricaine ekleyin. Diseksiyon mikroskobu yardımıyla embriyoları dekoryonat.
Dekoryonlanmış embriyolardan birini, ortasında sığ bir cam taban kuyusu olan küçük bir Petri kabına aktarmak için bir cam pipet kullanın ve fazla ortamı çıkarın. Daha sonra, embriyo distorsiyonunu ve hareketliliğini en aza indirmek için optimum konsantrasyonda bir agaroz solüsyonunu bir mikrofüj tüpüne yerleştirin ve ısıtın. Isı nedeniyle embriyoya zarar vermemek için sıcaklığı 30 santigrat dereceye düşürün.
İlk agaroz tabakasını embriyonun üzerine dökün ve sığ kuyuyu tamamen doldurun. Kuyunun üzerine başka bir kapak camı yerleştirin ve üzerine %1 agaroz ekleyin. İkinci katman, kapak camını yerinde tutar.
Agaroz katılaştıktan sonra, Petri kabını Trikat içeren E3 ortamı ile doldurun. Bu üçüncü katmandır ve agaroz ve embriyoyu nemli tutar. Aşağıdaki protokolde, uzun süreli görüntüleme için zebra balığı embriyolarının katmanlı agar montajını gerçekleştireceğiz.
- Montajdan hemen önce, agaroz solüsyonunu 65 santigrat dereceye ısıtın ve ardından embriyonun ısıdan
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin