Göz Lensi Diseksiyonu: Zebra Balığı Lens Morfolojisini Gözlemlemek İçin Bir Teknik

- Zebra balığı gözü kornea, sklera, lens ve retinadan oluşur. Kornea, ışığın göz içine girmesini sağlayan şeffaf bir dokudur. Sklera, kornea ile sürekli olan ve bir dış koruyucu tabaka oluşturan opak bir dokudur. Lens, ışığı nöral bir sinyale dönüştüren ışığa duyarlı bir doku tabakası olan retinaya ışığı odaklayan küresel bir yapıdır.

Gözü incelemek için bir Petri kabını silikonla doldurun ve sertleşmesine izin verin. Şimdi, uyuşturulmuş bir balığı tabağa koyun ve bir mikro makas kullanarak gözleri çıkarın. Dokuda sabit bir pH sağlamak için gözleri PBS ile doldurulmuş bir plakaya aktarın ve gözü arka tarafı yukarı bakacak şekilde yönlendirin. Gözü forseps ile tutun ve sklera ve retina boyunca dikkatlice üç radyal kesim yapın.

Ardından, lensi ortaya çıkarmak için dokuyu dışarı katlayın. Şimdi, gözü ön tarafı yukarı bakacak şekilde konumlandırın ve sklera ve retinayı çıkarın. Lensi diseke edilen gözden çıkarın ve etrafındaki kalan dokuyu çıkarın. Aşağıdaki protokolde, lens morfolojisini analiz etmek için larva ve yetişkin zebra balığı lens diseksiyonları yapacağız.

Trikat ile yeterli sedasyonun onaylanmasından sonra, her iki gözü de yetişkin veya larva zebra balığından hemen çıkarmak için mikrodiseksiyon makası kullanın ve her iki gözü de PBS ile doldurulmuş bir silikon diseksiyon kalıbı ile 35 milimetrelik özel yapım bir Petri kabına yerleştirin. Lensi yetişkin bir zebra balığından almak için, gözün arka tarafı yukarı gelecek şekilde yerleştirin ve forsepsleri optik diske 45 dereceden daha az bir açıyla yerleştirin. İmmobilize gözdeki siliyer bölgeye retina ve sklera yoluyla optik diskten iki veya üç radyal kesi yapmak için diseksiyon makası kullanın ve retina ve sklerayı çiçek yaprakları gibi geri soyun. Gözü ters çevirin, kornea tarafı yukarı bakacak şekilde retinayı ve bağlı dokuları uzaklaştırmak için forseps kullanırken sklera ve korneayı manipüle ederek lensi dolaylı olarak hareketsiz hale getirmek için makasın düz tarafını kullanın. Ardından lensteki fazla dokuyu dikkatlice kesin.

Larva zebra balığı lens hasadı için, bir larva gözü arka tarafı yukarı bakacak şekilde bir silikon PBS kabının düz kısmına oynar. Ve gözü başka bir iğne veya forseps ile hareketsiz hale getirirken retina ve skleradan radyo kesimleri yapmak için keskinleştirilmiş bir tungsten iğnesi kullanın. Ardından, özel yapım bir tungsten tel iğnenin künt tarafı ile lensi ayrışmış gözden nazikçe alın ve bağlı dokuyu dikkatlice çekin.