JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Biyoloji
0 görüntülenme • 3:58 dk. • April 30th, 2023
- Enjeksiyondan bir gece önce iki dişi ve iki erkek balığı bölünmüş bir üreme tankına koyun. Ertesi sabah, bölücüyü çıkarın ve tankın dibinde yumurtaları görene kadar balıkların üremesine izin verin. Yumurtaları toplayın ve bir mantar ilacı olan metilen mavisi içeren E3 ortamı ile yıkayın. Yumurtaları mikroskop altında gözlemleyin ve döllenmemiş yumurtaları çıkarın. Döllenmemiş yumurtalar berrak bir yumurta sarısı zarına sahipken, döllenmiş yumurtalar koyu renkli bir yumurta sarısı zarına sahiptir.
10 embriyoyu enjekte edilmemiş kontroller olarak ayrı bir Petri kabında tutun. Bir transfer pipeti kullanarak, embriyoları oda sıcaklığında bir mikroenjeksiyon plakasının oluğuna hizalayın ve mikroskobun altına yerleştirin. Mikroenjeksiyon iğnesini nazikçe koryondan yumurta sarısına itin ve fenol kırmızısı gibi bir işaretleyici içeren ilgili bir bileşiği yavaşça enjekte edin. Sitoplazmik akış, bileşiğin embriyonik hücrelere yayılmasını sağlar.
Enjeksiyondan sonra, embriyoları 28 santigrat derecede metilen mavisi ile E3 ortamında büyütün. Embriyoların sağlığını kontrol etmeye devam edin. Ölü veya anormal gelişen embriyoları çıkarın ve ortamı günlük olarak değiştirin. Aşağıdaki protokolde,
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin