zPDX-İnvazivlik Analizi: Zebra Balığı Embriyo Ksenogreftlerinde Metastatik Kanser Hücrelerinin İnvaziv Davranışının Araştırılması

Zebra balığı embriyo ksenogreftleri, kanser hücresi istilasını incelemede faydalıdır. Floresan etiketli metastatik kanser hücrelerini ve kanserli olmayan hücreleri iki transgenik embriyonun perivitellin boşluğuna enjekte ederek ksenogreft modelleri hazırlayın. Perivitellin boşluğu, embriyo peridermi ile yumurta sarısı kesesi arasındaki bir boşluktur. Embriyoların istenen süre boyunca büyümesine izin verin.

Bu süre zarfında, metastatik kanser hücreleri enjeksiyon bölgesinde agresif bir şekilde bölünürken, kanserli olmayan hücreler stabil kalır. Kuluçkadan sonra, embriyoları cam tabanlı bir süspansiyon kabına aktarmak için bir pastör pipeti kullanın. Fazla yumurta suyunu alın ve embriyoları görüntüleme için istenen pozisyona yerleştirin. Tabağın üzerine bir kapak fişi tutun ve tabağı parlak bir alan mikroskobu altına yerleştirin.

Görüntüleri yakalayın ve her iki hücre türünün istilacı davranışını analiz edin. Metastatik kanser hücreleri, enjeksiyon bölgesinden kan damarlarını istila etme eğilimindedir. Dolaşım boyunca hareket ederler ve daha sonra çoğalmak için çevredeki dokuyu istila ederler. Buna karşılık, kanserli olmayan hücreler enjeksiyon bölgesinde kalır. Örnek protokolde, metastazı incelemek için zebra balığı ksenogreft modellerinde Cuvier'in perivitellin boşluğuna ve kanalına meme kanseri hücreleri enjekte edeceğiz.

Metastazı görselleştirmek için, bir pastör pipeti ile enjekte edilen zebra balığı embriyosunu cam tabanlı bir polistiren kaba aktarın ve fazla yumurta suyunu alın. Embriyonun tüm gövdesini, genel bir tümör hücresi yayılım modeli elde etmek için düşük büyütmeye ayarlanmış bir konfokal mikroskopla görüntüleyin.

Zebra balığı embriyo damar sistemini görselleştirmek için 488 nanometre lazer ve kırmızı floresan işaretleyici ile etiketlenmiş implante edilmiş tümör hücrelerini görselleştirmek için 543 nanometre lazer kullanın. Ardından, yüksek kaliteli bir görüntü elde etmek için embriyoyu sekiz ila on adımda tarayın.

• Zebrafish Embryo Xenografts - A research tool used to study cancer cell invasion.
• Perivitelline Space - A niche between the zebrafish embryo periderm and the yolk sac.
• Metastatic Cancer Cells - Malignant cells that can spread aggressively and invade lots areas .
• Non-cancerous Cells - Stable cells that do not invade or proliferate like cancer cells.
• Invasiveness - The capacity of cancer cells to infiltrate healthy tissues.

• Define the concept of Zebrafish Embryo Xenografts - These are used for studying cancer invasion (e.g., invasiveness).
• Outline the Perivitelline Space - It serves as the injection site for xenografts (e.g., perivitelline space zebrafish).
• Describe Metastatic Cancer Cells and their aggressive division and invasion traits.
• Connect to Experiment - The injected metastatic and non-cancerous cells in embryos facilitate the investigation of cellular behaviors.

• What is Zebrafish Embryo Xenografts and how it aids in studying cell invasiveness?
• What is the role of Perivitelline Space in these xenograft models?
• What difference in behavior can be expected between Metastatic Cancer Cells and Non-cancerous Cells?

• Practical Applications - Xenografts help in understanding cancer cell behaviors (e.g., invasiveness).
• Industry Impact - Such studies can guide developments in healthcare and cancer research.
• Societal Importance - Findings may result in better cancer treatments (e.g., combating malignancy).
• Scientific Advances -The methodology aids in real-time tracking of cell actions.