JoVE Encyclopedia of Experiments
Kanser Araştırmaları
0 görüntüleme • 2:25 dk • April 30th, 2023
Zebra balığı embriyo ksenogreftleri, kanser hücresi istilasını incelemede faydalıdır. Floresan etiketli metastatik kanser hücrelerini ve kanserli olmayan hücreleri iki transgenik embriyonun perivitellin boşluğuna enjekte ederek ksenogreft modelleri hazırlayın. Perivitellin boşluğu, embriyo peridermi ile yumurta sarısı kesesi arasındaki bir boşluktur. Embriyoların istenen süre boyunca büyümesine izin verin.
Bu süre zarfında, metastatik kanser hücreleri enjeksiyon bölgesinde agresif bir şekilde bölünürken, kanserli olmayan hücreler stabil kalır. Kuluçkadan sonra, embriyoları cam tabanlı bir süspansiyon kabına aktarmak için bir pastör pipeti kullanın. Fazla yumurta suyunu alın ve embriyoları görüntüleme için istenen pozisyona yerleştirin. Tabağın üzerine bir kapak fişi tutun ve tabağı parlak bir alan mikroskobu altına yerleştirin.
Görüntüleri yakalayın ve her iki hücre türünün istilacı davranışını analiz edin. Metastatik kanser hücreleri, enjeksiyon bölgesinden kan damarlarını istila etme eğilimindedir. Dolaşım boyunca hareket ederler ve daha sonra çoğalmak için çevredeki dokuyu istila ederler. Buna karşılık, kanserli olmayan hücreler enjeksiyon bölgesinde kalır. Örnek protokolde, metastazı incelemek için zebra balığı ksenogreft modellerinde Cuvier'in perivitellin boşluğuna ve kanalına meme kanseri hücreleri enjekte edeceğiz.
Metastazı görselleştirmek için, bir pastör pipeti ile enjekte edilen zebra balığı embriyosunu cam tabanlı bir polistiren kaba aktarın ve fazla yumurta suyunu alın. Embriyonun tüm gövdesini, genel bir tümör hücresi yayılım modeli elde etmek için düşük büyütmeye ayarlanmış bir konfokal mikroskopla görüntüleyin.
Zebra balığı embriyo damar sistemini görselleştirmek için 488 nanometre lazer ve kırmızı floresan işaretleyici ile etiketlenmiş implante edilmiş tümör hücrelerini görselleştirmek için 543 nanometre lazer kullanın. Ardından, yüksek kaliteli bir görüntü elde etmek için embriyoyu sekiz ila on adımda tarayın.
Bu çalışma, kanser hücresi invazyonunu incelemek için zebrafish embriyo ksenogreftlerinin kullanımını araştırmaktadır. Floresan işaretli metastatik ve kanserli olmayan hücrelerin zebrafish embriyolarının perivitelin boşluğuna enjekte edilmesiyle araştırmacılar, bu hücre tiplerinin büyüme sırasındaki belirgin davranışlarını gözlemleyebilmektedir.
Zebrafish embriyo ksenogreftlerinde metastatik kanser hücre invazivitesinin kantitatif analizi, erken evre hedef doğrulaması ve mekanistik risk azaltma için hızlı bir in vivo sistem sunar. Bu model, kanser hücresi yayılımının doğrudan görüntülenmesine ve ölçülmesine olanak tanıyarak preklinik onkoloji süreçlerinde öngörü güvenilirliğini destekler. Bu yaklaşım, portföy seçimi ve anti-metastatik adayların önceliklendirilmesine bilgi sağlamak üzere stratejik olarak konumlandırılmıştır.
Bu zebra balığı ksenogreft deneyi, keşiften preklinik aşamaya kadar olan sürece entegre olarak, memeli çalışmaları öncesinde erken hipotez testi ve mekanistik risk azaltma imkanı sağlar.
İlgili videolar
0 Görüntüler
İlgili videolar
0 Görüntüler
İlgili videolar
0 Görüntüler
İlgili videolar
0 Görüntüler
İlgili videolar
0 Görüntüler
İlgili videolar
0 Görüntüler
İlgili videolar
0 Görüntüler
İlgili videolar
0 Görüntüler
İlgili videolar
0 Görüntüler
İlgili videolar
0 Görüntüler
Son güncelleme: 29 Ağustos 2026