Hindistan Mürekkep Şişirme: Tümör Nodüllerini Görselleştirmek İçin Bir Boyama Yöntemi

JoVE Encyclopedia of Experiments

Kanser Araştırmaları

0 görüntüleme • 3:07 dk • April 30th, 2023

Ötenazi yapılmış bir farenin ventral tarafı yukarı bakacak şekilde cerrahi bir yatağa yerleştirerek ve hayvanın uzuvlarını sabitleyerek başlayın. Makas kullanarak, göğüs kafesinden tükürük bezlerine kadar orta hat boyunca kesin. Yükseltmek ve izole etmek için trakeanın altına bir pipet ucu yerleştirin. Ameliyat yatağını 180 derece döndürün. Trakeaya Hindistan mürekkebi lekesi içeren bir şırınga iğnesi yerleştirin ve direnç hissedene kadar mürekkebi akciğerlere enjekte edin.

Kanser hücreleri, hücre yüzeyinde güçlü bir negatif yük oluşturan büyük miktarda laktik asit salgılar. Bu hücreler asidik bir leke olan Hindistan mürekkebi ile lekelendiğinde, hücre yüzeyi lekeyi iter ve lekesiz kalır.

Trakeayı kesmek için makas kullanın ve akciğerlerin altına bir cımbız kaydırın. Akciğerleri yavaşça hayvanın vücudundan dışarı çekin. Akciğerleri suyla durulayın ve fazla lekeyi çıkarmak ve dokuyu bir davlumbazda sabitlemek için Fekete solüsyonu içeren bir şişeye aktarın. Tümör nodülleri koyu arka plana karşı beyaz görünür.

Aşağıdaki protokolde, akciğer metastazı doğrulamak için Hindistan mürekkep şişirme tekniğini uygulayacağız.

Primer tümörün akciğere metastazını doğrulamak için, önce fareyi bir polistiren tahta üzerine sırtüstü pozisyonda yerleştirin ve trakeaya engelsiz bir erişim sağlamak için bacakları sabitleyin. Fareye% 70 etanol püskürtün. Ardından, farenin orta karın bölgesinin orta hattı boyunca göğüs kafesinden tükürük bezlerine doğru bir kesi yapmak için bir makas kullanın. Trakeayı tanımlayın. Ardından, çevredeki dokuları çıkarmak için forseps kullanın.

Daha sonra, bir elinizde bir pipet ucu tutarak, ucu trakeanın altından geçirin ve dokuyu yavaşça yukarı ve vücuttan uzaklaştırın. Trakeayı yüksekte tutarak, diseksiyon platformunu 180 derece döndürün. Ardından, trakeaya yarım cc 27 gauge tüberkülin şırıngası yerleştirin ve güçlü bir direnç hissedilene kadar akciğerleri Hindistan mürekkebi ile tamamen şişirin.

Ardından, bir makas kullanarak trakeayı kesin. Fareyi bir forseps ile yerinde tutun, akciğerlerin altına başka bir forseps yerleştirin ve akciğer loblarını fareden dışarı çekin. Akciğerleri bir bardak su içinde kısa bir süre durulayın ve dokuyu bir çeker ocak içine aktarın. Daha sonra, akciğerleri 3 mililitre Fekete çözeltisi içeren bir cam sintilasyon şişesine yerleştirin ve çözeltinin buharlaşmasını önlemek için şişeyi kapatın. Birkaç dakika sonra, akciğerleri bir Petri kabına aktarın ve tek, beyaz, metastatik tümör nodüllerinin sayısını sayın.

06:31

Primer Tümör ve Akciğer Metastazı Eğitim için MEF Hücre İzolasyonu

İlgili videolar

0 Görüntüler

07:39

Tümör hücre görselleştirme akciğer dokusu içinde dolaşan bir akciğer kolonizasyon tahlil kurulması

İlgili videolar

0 Görüntüler

11:15

Tümör ve Mezenkimal Kök hücreler arasında ekstrasellüler vezikül aracılı iletişim tanımlamak için osteosarkom preklinik fare modeli

İlgili videolar

0 Görüntüler

08:06

Deneysel metastaz ve CTL Kabul edilmiş Transfer İmmünoterapi Fare Modeli

İlgili videolar

0 Görüntüler

12:03

Oral Skuamöz Hücre Karsinomu Ortotopik Fare Modeli Tümör Hücre Invasion Multi-foton Görüntüleme

İlgili videolar

0 Görüntüler

14:04

Viral Nanopartiküller

İlgili videolar

0 Görüntüler

13:16

Karbon Siyah Mürekkep İntravasküler Perfüzyon Serebral Gemiler Güvenilir Görselleştirme verir

İlgili videolar

0 Görüntüler

04:13

Tümöre Özgü Antikorların İn Vivo Lokalizasyonunu Değerlendirmek İçin Bir Teknik

İlgili videolar

0 Görüntüler

07:00

Mikroskopik Kemik Metastazı Verimli ve Seçici Modelleme için intra-iliak arter Enjeksiyon

İlgili videolar

0 Görüntüler

08:11

Spontan Meme Kanseri metastaz Ortotopik Fare Modeli

İlgili videolar

0 Görüntüler

Son güncelleme: 22 Ağustos 2026