JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Kanser Araştırmaları
0 görüntülenme • 3:34 dk. • April 30th, 2023
İnterstisyel Sıvı Basıncı veya IFP, bir dokudaki hücreler arasındaki boşluklarda sıvının uyguladığı kuvvettir. İlk olarak, tümör taşıyan bir fareyi oksijenle karıştırılmış %2 izofloran ile uyuşturun ve bilgisayarlı tomografi veya CT-IFP robot platformunda hareketsiz hale getirin. Şimdi, tümörü görselleştirmek için bir kontrast madde ile kapsüllenmiş lipozomlarla bir farenin lateral kuyruk damarına enjekte edin. Hayvanı kafesine geri koyun ve iyileşmesine izin verin.
Enjeksiyondan 48 ila 72 saat sonra, anestezi uygulanmış fareyi CT-IFP platformuna sabitleyin ve IFP'yi ölçmek için tümör üzerinde eşit aralıklı birkaç pozisyon seçin. Ardından, yerleştirmeden önce IFP sistem iğnesini bir heparin salin solüsyonu ile yıkayın. İğneyi seçilen konuma getirin ve tümör dokusunun içine yerleştirin.
Şimdi tüm konumlarda görüntüler elde edin ve yazılımı kullanarak IFP'yi ölçün. Tümördeki IFP, yoğun doğası, anormal kan damarları ve kusurlu lenfatik sistem nedeniyle genellikle yüksektir. Bu, tümör çevresinde lipozomların birikmesine yol açabilir. Aşağıdaki protokolde, katı bir tümörde IFP'yi ölçme tekniğini göstereceğiz.
IFP'yi ölçmek için, hayvanı CT-IFP robot platformuna, tümör hareketsiz hale gelecek ve CT-IFP robot sistemi tarafından erişilebilir olacak şekilde bantlayın. Az önce gösterildiği gibi anatomik bir mikro BT taraması elde edin, ardından iğne öncesi yerleştirme verilerini CT-IFP robot hizalama yazılımına yükleyin ve tümörü görselleştirmek için pencereyi ve seviyeyi ayarlayın. Herhangi bir görüntüde tümörün kenarına tıklayın, ardından tümörün bitişik tarafında ikinci bir kenar konumunun seçilmesini izleyin.
Yazılım, iki nokta arasındaki doğrusal bir çizgi boyunca bir dizi konumu hesaplayacaktır. Ardından, listeden beş ila sekiz eşit aralıklı konumdan oluşan bir dizi için x, y ve z koordinatlarını seçin. Daha sonra, IFP sistem iğnesini tuzlu su heparin solüsyonu ile yıkayın ve önceden belirlenmiş ilk iğne konumlarını CT-IFP robot kontrol yazılımının XYZ koordinat pencerelerine girin.
Robotu istediğiniz konuma taşımak için Git düğmesine basın. Ardından, sırayla her iğne konumu için, İğneyi dokuya sokmak için İğne Yerleştir düğmesine tıklayın. IFP iğnesi ile doku arasında iyi bir sıvı iletişimi olduğunu doğrulamak için PE-20 hortumunu sıkıştırın ve serbest bırakın ve IFP ölçümünün arttığını ve IFP edinme yazılımındaki ön kıstırma değerine geri döndüğünü gözlemleyin. Son olarak, iğneyi dokudan çıkarmak için taramanın sonundaki İğneyi Geri Çek'e tıklayarak iğne takılıyken anatomik bir BT taraması yapın.