CTC İmmünofloresan Testi: Dolaşımdaki Tümör Hücrelerini Karakterize Etmek İçin Bir Teknik

- Başlamak için, izole edilmiş dolaşımdaki tümör hücrelerini veya CTC'leri, hücreleri sıvı kesilmesinden ve basınç hasarından koruyan bir bağlanma önleyici solüsyon kullanarak gerekli konsantrasyona seyreltin. Daha sonra, bir poli-lizin kaplı mikroskop lamını ve bir sitosantrifüj filtre kartını bir sitosantrifüj hunisi düzeneğine monte edin. Hücre süspansiyonunu düzeneğin huni portuna aktarın ve ardından sitosantrifüjleme yapın.

Merkezkaç kuvveti, tek katmanlı bir hücre tabakasını slayt üzerindeki dairesel bir alana yoğunlaştırır ve biriktirir. Silikon bir izolatör kullanarak hücrelerle biriken alanı izole edin. Kuruduktan sonra hücreleri paraformaldehit kullanarak sabitleyin. Daha sonra, hücreleri, hücre yüzeyindeki spesifik olmayan herhangi bir bağlanma bölgesine kolayca bağlanan proteinler içeren uygun bir bloke edici çözelti ile inkübe edin.

Şimdi, hücreleri floresan etiketli bir antikor çözeltisi ile etiketleyin. Florofor etiketli antikorlar, hücre yüzeyindeki spesifik hedef molekülleri tanır ve onlara bağlanır. Bağlanmamış antikorları çıkarmak için numuneyi yıkayın. Numuneyi görüntülemeye hazırlamak için bir montaj solüsyonu ekleyin.

CTC'lerdeki hedef antijenlere bağlı antiko