Antikor mikrodizisi: miRNA ile tedavi edilen akciğer kanseri hücrelerinin protein ekspresyonunu incelemek için bir teknik

0 views • 3:02 min • April 30th, 2023

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

- Protein örneğine bir biyotin çözeltisi ve bir etiketleme tamponu ekleyerek başlayın. Biyotinin proteinlere bağlanmasını kolaylaştırmak için inkübe edin. Bir durdurma reaktifi ve girdap ekleyin. Daha sonra, antikorların spesifik olmayan bağlanmasını önlemek için bir bloke edici reaktif içeren bir tabağa bir antikor mikrodizi slaydı yerleştirin. Engelleme solüsyonunu çıkarmak için slaytı çift damıtılmış suyla yıkayın. Mikrodizi slaytını bir hazneye yerleştirin. Biyotinile protein örneğini bir birleştirme çözeltisi ile karıştırın ve hedef proteinlerin karşılık gelen antikorlarına bağlanmasını kolaylaştırmak için lam üzerine ekleyin. Sürgüyü yıkama tamponu içeren bir tabağa aktarın ve tamponu çift damıtılmış su ile değiştirin. Daha sonra, slaytı, biyotinile proteinlere bağlanmasını desteklemek için floresan etiketli streptavidin içeren bir algılama tamponuna yerleştirin.

Floresan yoğunluğunu korumak için çanağı karanlıkta inkübe edin. Slaytı çıkarın ve bir mikrodizi tarayıcıya yerleştirin. Tarayıcı, hedef proteine bağlı streptavidinden gelen floresan sinyalleri arar. Floresan yoğunluğuna bağlı olarak, yazılım protein ekspresyonunun derecesini analiz eder. Aşağıdaki protokolde, hücre döngüsü ile ilişkili gen ekspresyonundaki değişiklikleri analiz etmek için bir antikor mikrodizisi gerçekleştiriyoruz.

- Bu deney, mikroRNA tedavisi ile tüm hücre döngüsü yolu proteinlerinin ekspresyon değişikliğini tanımlamak içindir. Transfeksiyon bölümünde açıklanan prosedüre göre protein örneklerini toplayın ve BCA testi ile nicelleştirin. Oda sıcaklığına getirmek ve nemi gidermek için slaytları deneyden bir saat önce eksi 4 santigrat dereceden çıkarın. 70 mikrogram protein numunesi alın ve metin bölümünde adım adım açıklanan üreticinin talimatlarına göre numune slaytları hazırlayın.

Burada dikkat edilmesi gereken, slaytların ultra saf deiyonize su ile uygun şekilde yıkanması, slaytların arka planını azaltmaya yardımcı olacağı için bir diğer önemli adımdır. Ek olarak, bu deneyde numune slaytlarının son adıma kadar kurutulmaması çok önemlidir. Son olarak, mikroarray makinesini kullanarak slaydı tarayın ve verileri analiz edin.

13:21

Kompleks Örnekleri spesifik protein Glikozilasyon arasında Multiplexed Yüksek verim Profilleme için Kimyasal-bloke Antikor Mikroarray

Related Videos

0 Views

06:26

3D-FRAP Mikroskopisi ile Gap Birleşimine Bağlı MiRNA Transferinin Analizi

Related Videos

0 Views

06:01

Hücre dışı Protein Mikroarray teknoloji yüksek işlem hacmi düşük benzeşme reseptör-Ligand etkileşimleri algılanması için

Related Videos

0 Views

07:04

Özel MicroRNA Mikroarray deneyler gerçekleştirme

Related Videos

0 Views

15:17

Kolorektal Kanser Hücre Yüzey Protein Profil Antikor Mikroarray ve Floresans Multiplexing

Related Videos

0 Views

16:24

Meme Kanseri Hücrelerinde östrojen düzenlenmiş microRNA profil

Related Videos

0 Views

10:16

IgG ve IgM Antikorlarının Eşzamanlı Algılama için İki Renkli Antijen Mikroarray'ler Üretimi

Related Videos

0 Views

08:14

MikroRNA tabanlı sıvı biyopsi: Plazma miRNA imza Sınıflandırıcısı (MSC) akciğer kanseri süzmek için bir deneyim

Related Videos

0 Views

07:07

Akciğer mikroRNA profil oluşturma arasında Estrous döngüsünde ozon maruz fareler

Related Videos

0 Views

11:44

Kombinatorik miRNA düzenleyen hücre döngüsü ve anjiogenezi tedavilere analizi

Related Videos

0 Views

Last updated: 18 July 2026