JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Kanser Araştırmaları
0 görüntülenme • 4:11 dk. • April 30th, 2023
- Koloni oluşumu testi, kanser hücresinin büyümesi, çoğalması ve yarı katı ortamda kolonilere farklılaşması üzerine bir antikanser ilacının in vitro analizidir. Başlamak için, RPMI ortamındaki kanser hücrelerini büyüme takviyesi ile tohumlayın - fetal sığır serumu veya FBS ve antibiyotik. Hücreleri gereken süre boyunca inkübe edin.
Daha sonra, istenen hücre konsantrasyonunu bir mikrofüj tüpünde ve santrifüjde toplayın. Peleti PBS'de yeniden askıya alın. Metilselüloz bazlı besiyerini hazırlayın ve optimum büyümeyi desteklemek için FBS ile farklı tüplere dağıtın.
Tüplere uygun miktarda hücre süspansiyonu ekleyin ve hücreleri ortamla karıştırmak için girdaplayın. Daha sonra, tüplere antikanser bileşikleri ekleyin ve DMSO ekleyerek bir kontrol hazırlayın. Vorteks tüpleri.
Bu hücre karışımını kültür plakasına ekleyin ve istenen süre boyunca inkübe edin. İnkübasyondan sonra, metiltiyazol difeniltetrazolyum bromür veya MTT ekleyin ve bir süre inkübe edin. MTT, canlı hücrelerdeki sarı tetrazolyum tuzunu mor formazan kristallerine indirger. Canlı koloniler menekşe rengine döner. Bir dijital kamera kullanarak görüntüleri yakalayın ve canlı kolonileri analiz edin. Aşağıdaki protokolde, akciğe
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin