Zebra Balığı Ksenogreft Testi: Zebra Balığı İn Vivo Tedavisinde Terapötiklerin Tümörojenite Üzerine Anti-kanser Etkinliğini Değerlendirmek İçin Bir Yöntem

- İlk olarak, yumurtaları bir Petri tabağına koyun ve taze toplanmış yumurtaları korumak için Danieau'nun solüsyonunu ekleyin. Pigmentasyonu inhibe etmek için fenil tiyoüre ekleyin ve birkaç gün inkübe edin. Kuluçkadan sonra, embriyoları keskin forseps kullanarak dekoryonlayın ve daha fazla büyümelerine izin verin.

Daha sonra, bir kültür şişesinde istenen sayıda kanser hücresi tohumlayın ve gece boyunca inkübe edin. Şimdi antikanser bileşikleri ekleyin ve daha fazla inkübe edin. İnkübasyondan sonra, hücre zarına bağlanacak ve hücreleri lekeleyecek olan floresan hücre izleyici boyası ekleyin.

Daha sonra, hücre ayrışması için tripsin ekleyin ve pH'ı değerlendirmek için prosedürden önce hücreleri fenol kırmızısı PBS çözeltisinde seyreltin. Anestezi uygulanmış zebra balığı embriyolarını bir agar tabağına monte edin. Şimdi mikrokılcal damarları kanser hücresi süspansiyonu ile yükleyin ve embriyoların yumurta sarısı kesesine enjekte edin.

Embriyoları Danieau'nun solüsyonunu içeren kültür plakalarına aktarın ve daha fazla inkübe edin. Daha sonra, birkaç embriyoyu bir cam slayt üzerine aktarın ve onları hareketsiz hale getirmek için metilselüloz ekleyin. Slaytı bir floresan mikroskobu altı