İmmünofloresan Testi: Tıbbi Bir Tel Üzerinde Yakalanan Tümör Hücrelerini Tanımlamak İçin Bir Yöntem
JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Kanser Araştırmaları
0 görüntülenme • 4:32 dk. • April 30th, 2023
- İlgilenilen antikorlarla birleştirilmiş bir hidrojel ile kaplanmış küçük bir altın kısma sahip işlevsel bir tel alın. Telin altın kısmını tümör hücreleri içeren bir şişeye batırın. Bir tel tıpa ile kapatın ve bir tüp döndürücüde inkübe edin. Yüzey antijenlerini gösteren dolaşımdaki tümör hücreleri veya CTC'ler, tel üzerindeki antikorlara bağlanır. Fosfat tamponlu salin veya PBS içeren şişelere daldırarak teli durulayın ve havayla kurutun. Şimdi hücreleri dehidre ederek sabitlemek için teli bir aseton çözeltisine batırın.
Ardından, teli, içinde işlevsel parça bulunan bir P200 ucundan yavaşça geçirin. Teli daldırmak için bandı bir florokrom ile konjuge edilmiş bir antikorla doldurun. Bu etiketli antikorlar, hücrelerde bulunan ilgili antijenlerine bağlanacaktır. Açıklığı bir laboratuvar filmi ile kapatın ve gece boyunca karanlıkta 4 santigrat derecede inkübe edin. Daha sonra, bağlanmamış antikorları çıkarmak için teli PBS ile yıkayın. Teli bir tel tutucuya yerleştirin ve floresan mikroskobu altında görüntüleyin. Antikorlar tarafından bağlanan CTC'ler tel üzerinde floresan yayılır. Aşağıdaki protokolde, CTC'leri tıbbi bir tel üzerinde yakalayacağız ve bunları immünofloresan boyama il
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin