Formalinle Sabit Parafin Gömülü (FFPE) Doku Koruma: Doku Morfolojisini İncelemek İçin Bir Yöntem

- İlk olarak, ozmolariteyi dengeleyerek hücre büzülmesini veya şişmesini önlemek için PBS ile ıslatılmış bir filtre kağıdına bir doku dilimi yerleştirin. Dokuyu bir histo kasete aktarın. Kaseti kapatın ve nötr tamponlu formalin, NBF çözeltisine yerleştirin. NBF, amino asitlerin amino gruplarına bağlanan ve dokuyu pigmentleyen formik asit oluşumunu önleyen formaldehit içerir. Kaseti gece boyunca düşük bir sıcaklıkta bırakın, bu da nükleik asit bozulmasını önler ve dokuyu sabitler. Dokuyu birden fazla alkol yıkaması ile kurutun.

Sıvı parafine yerleştirin ve kalıbın dibine kadar bastırın. Ağırlığı çıkarın ve histo kasetinin alt kısmını dokunun üzerine yerleştirin. Düzeneğin üzerine sıvı parafin dökün. Kurulumun soğuk bir plaka üzerinde katılaşmasına izin verin. Parafin suda çözünmez ve susuz dokuya girdikten sonra sertleşir ve bölünmeye yardımcı olur. Doku bloğunu bir mikrotom üzerine aktarın. Dokunun ince bölümlerini bir slayt üzerinde kesin ve toplayın. Kesit çok kalınsa, oksijen ve diğer besinler dilim boyunca yayılamaz ve yanlış bir nekroz gradyanı oluşturur. Bölüm çok inceyse, kıvrılma eğilimindedir. Protokol videosu, akciğer kanserinin FFPE dokularından biyobelirteç ekspresyonun