Pankreas Tümöründe Ex Vivo T Hücre Stimülasyonu: T Hücrelerinde Sitokin Üretimini Artırmak İçin Bir Yöntem

- Aktive edilmiş T hücreleri, pankreas tümörü mikro çevresine hareket eder, burada interferon-gama veya IFN gama gibi sitokinleri ve etkili bir antitümör yanıtına aracılık etmeye yardımcı olan tümör nekroz faktörü-alfa veya TNF alfa salgılarlar. Sitokinler hızla T hücresinden dışarı çıktıkça, hücre içi seviyeler tespit edilemeyebilir. Bu nedenle, T hücresi, tümördeki terapötik rollerini incelemek için bazal sitokin üretimini artırmak için stimülasyona ihtiyaç duyar.

Farenin pankreasından tümör hücrelerinin bir süspansiyonunu alarak başlayın. Şimdi, hücre süspansiyonunda bulunan T hücrelerini bir sitokin stimülasyon kokteyli ile tedavi edin ve karışımı istenen süre boyunca inkübe edin. Bu kokteyl, kalsiyum iyonlarının endoplazmik retikulumdan sitoplazmaya salınmasını kolaylaştırır. Yüksek kalsiyum seviyeleri, sırayla, belirli nükleer transkripsiyon faktörlerini aktive ederek T hücrelerinde sitokin üretiminde bir artışa yol açar.

Daha sonra, hücreleri bir protein taşıma inhibitörü kokteyli ile tedavi edin ve tüpü inkübe edin. Bu kokteyl, endoplazmik retikulumdan golgi kompleksine sitokin taşınmasını bloke ederek hücre içinde sitokin birikimine neden olur. Son olarak, akış sitometrisi