JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Kanser Araştırmaları
0 görüntülenme • 6:36 dk. • April 30th, 2023
- Pankreas asiner hücresi, çeşitli sindirim enzimleri içeren bir ekzokrin hücredir. Bazen, onkojenik sinyallemeye yanıt olarak, asiner hücre bir duktal hücreye dönüşür. Bu duktal hücre daha sonra kanserli hale gelebilir. Bu nedenle, pankreas kanserinin ilerlemesindeki rollerini incelemek için asiner hücreleri izole etmek hayati önem taşır.
Pankreası ötenazi yapılmış bir fareden izole ederek başlayın. Pankreası, bir antibiyotik ile desteklenmiş dengeli bir tuz çözeltisi içeren bir tartı teknesine ekleyin. Pankreası makas kullanarak küçük parçalar halinde doğrayın ve pankreas dokusunu bir tüpe ekleyin. Daha sonra, tüpteki pankreas parçalarına kollajenaz çözeltisi ekleyin.
Kolajenaz, dokuyu bir arada tutan kolajeni sindirir, böylece doku ince parçalara ayrılır. Şimdi, tüpe serum içeren ortam ekleyin ve dokuyu buzun üzerine yerleştirin. Bu, kollajenazın etkisini durdurmaya yardımcı olur.
Dokuyu ve ortamı iki kez filtreleyin, ince doku süspansiyonu elde etmek için her seferinde filtrenin ağ boyutunu kademeli olarak azaltın. Son olarak, peletteki asiner hücreleri toplamak için elde edilen süspansiyonu santrifüjleyin. Süpernatanı çıkarın ve daha fazla analiz için asinar hücreleri saklayın
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin