3D sferoidlerde hücre dışı akı testi: pankreas tümör sferoidlerinin metabolik aktivitesini ölçmek için bir yöntem

- Pankreas kanseri hücreleri, tümör mikroçevresinde veya TME'de kanserle ilişkili fibroblastlarla etkileşime girer. Bu etkileşimler kanser hücrelerinin metabolik aktivitesini modüle eder ve kanserin ilerlemesini etkiler.

Sferoidler, TME'yi in vitro olarak özetleyen hücresel agregalardır. Bu nedenle, bu sferoidleri, hücre dışı akı testi ile tümörün metabolik fonksiyonlarındaki değişiklikleri test etmek için kullanabiliriz. Bu test, sırasıyla aerobik ve glikolitik metabolizmayı belirlemek için hücre dışı oksijen ve proton konsantrasyonunu ölçer.

Pankreas kanseri hücrelerinin pankreas fibroblastları ile birlikte kültürlenmesiyle elde edilen uygun boyutta 3D sferoidleri alarak başlayın. Şimdi, sferoidleri bir akı analiz plakasına aktarın ve test ilaçları içeren bir sensör kartuşu ile örtün. Tahlili hücre dışı bir akı analizöründe çalıştırın.

Akı analizörü, test ilaçlarını sensör kartuşundan belirli zaman noktalarında analiz plakasına pnömatik olarak enjekte eder. Test ilaçlarına yanıt olarak, hücreler protonları ve oksijeni plaka mikro odasına salar ve sensör probunda bulunan floroforlar bu seviyeleri ölçer. Son olarak, uygun yazılımı kullanarak sferoidlerin işlevselliğini analiz edin.