Floresan Ortotopik Fare Modeli: İn Vivo Tümör İlerlemesini Değerlendirmek için GFP İfade Eden Kanser Hücrelerinin Fareye İmplante Edilmesi

- Yeşil floresan proteini veya GFP eksprese eden kanser hücreleri, non-invaziv optik görüntüleme ile tümör büyümesinin ve metastazının izlenmesini sağlar. Bu hücreleri genellikle tümör mikroçevresinin yeniden oluşturulmasına izin veren ve tümör hücrelerinin çevreleriyle etkileşimini taklit eden ortotopik bir modele implante ederiz.

Anestezi uygulanmış bir fareyi ılık bir ısıtma yastığına yerleştirerek başlayın. Şimdi, oksijen ve bir anestezik olan izofluran sağlamak için burnunu bir burun maskesine sokun. Bir makas kullanarak küçük bir kesi yapın ve dokuyu kesin. Dalağı pankreas ile birlikte yavaşça dışarı çekin ve pankreas kuyruğunu bulun.

Floresan kanser hücreleri süspansiyonlu bir şırınga yükleyin ve yavaşça pankreas kuyruğuna enjekte edin. Enjekte edilen bölgede başarılı implantasyonu onaylayan yüzeysel bir kabarcık belirir. Organları vücut boşluğuna geri yerleştirin ve kesiyi kapatmak için steril bir dikiş kullanın. Şimdi, fareyi bir kafese geri koyun ve iyileşene kadar izleyin.

İstenilen süreden sonra, fareyi bir görüntüleme odasına yerleştirin ve görüntü alın. Işık huzmesi kanser hücrelerine çarpar ve GFP'yi uyarır, bu da yeşil bir floresan üretir. Aşağıdaki protokolde, orto