Küre Oluşum Testi: Pankreas Kanseri Kök Hücrelerini Tanımlamak için İn Vitro Bir Yöntem ve Tarama Tedavileri

- Pankreatik Duktal Adenokarsinom (PDAC), yalnızca tümörjenik Kanser Kök Hücrelerinin (CSC) bir alt kümesini içerir. CSC'ler kendi kendini yenileyebilir, pluripotent ve tümör oluşturma yeteneğine sahiptir. Anti-apoptotik proteinleri eksprese ederler ve ayrıca çoklu ilaca dirençli genler içerirler, bu da onları kemoterapiye dirençli hale getirir. Kanser kök hücrelerini tanımlamak ve ilaçların onlar üzerindeki etkisini incelemek için bir küre oluşturma testi yapıyoruz.

İlk olarak, ekstrakte edilen kanser kök hücrelerini istenen hücre kültürü ortamında askıya alın. Daha sonra, hücre süspansiyonunu çok kuyulu bir plakaya tohumlayın ve istenen süre boyunca inkübe edin. Negatif kontrol olarak birkaç kuyucuğa gerekli miktarda ilgili ilacı ve diğer kuyucuklara plasebo ekleyin. Hücreleri istenen süre boyunca inkübe edin. Kanser kök hücreleri, yapışık olmayan bir kültür ortamı altında küre şeklinde koloniler oluşturur.

İnkübasyondan sonra, bir hemositometre üzerine az miktarda hücre süspansiyonu pipetleyin ve otomatik bir hücre sayacına yerleştirin. Şimdi, oluşan kürelerin sayısını sayın. İlaçla tedavi edilen hücreler genellikle kürelerin boyutunda ve sayısında önemli bir azalma gösterir. Aş