JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Kanser Araştırmaları
0 görüntülenme • 6:26 dk. • April 30th, 2023
- Tümör invazyonunda, periferik tümör hücreleri epitelyal-mezenkimal geçişe veya EMT'ye uğrar, bu da hücre dışı matrisin veya ECM'nin lokal bozulmasına neden olur. Tümör hücrelerinin ECM ile etkileşimini in vitro olarak inceleyebiliriz.
Bu etkileşimleri incelemek için, pankreas tümör hücrelerinden türetilen önceden oluşturulmuş bir sferoidi, gömülü floresan izleyici probları ve kültür ortamı ile birlikte kollajen iskelesi içeren bir plakaya aktarın. Tümör sferoidi, kollajeni bozan ve ECM sertliğini azaltan proteazları serbest bırakır ve bu da ECM'de izleyici probların serbest hareketine neden olur.
Plakayı istenen süre boyunca inkübe edin. Kollajen iskelesindeki numune noktalarının ızgarasına bakmak ve bunlardan video verileri kaydetmek için numuneyi ışık mikroskobu altında gözlemleyin. Matrisin sferoid yakınındaki bölgesi maksimum kollajen yıkımı gösterir. Bu nedenle, prob hareketini arttırmıştır. Buna karşılık, sferoidden daha uzak alan daha az kollajen bozulması gösterir ve bu da prob moleküllerinin kısıtlı hareketine neden olur.
İzleyici parçacıkların yörüngelerini ölçerek ECM'nin reolojik özelliklerini incelemeye yönelik bu teknik, parçacık izleme mikroreolojisi veya PTM olara
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin