JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Kanser Araştırmaları
0 görüntülenme • 3:50 dk. • April 30th, 2023
- Reaktif oksijen türleri, elektronlar elektron taşıma zincirinden sızdığında ağırlıklı olarak mitokondriden üretilir. Bu elektronlar moleküler oksijen ile birleşerek çeşitli reaktif oksijen türlerine veya ROS'a yol açar. Kanser hücrelerinde, reaktif oksijen türlerinin aşırı üretimi vardır. Bu oldukça reaktif ROS molekülleri, hücre içindeki zarlara, proteinlere ve DNA'ya oksidatif olarak zarar verebilir.
Artan ROS seviyeleri, DNA'ya zarar verir ve kanserin ilerlemesine neden olan onkojenik bir sinyal yolunun aktivasyonuna yol açar. Bu nedenle, kanser hücreleri tarafından üretilen reaktif oksijen türlerinin seviyelerini tespit etmek hayati önem taşır.
İnsan kolorektal kanserinden kanser hücrelerini uygun bir kültür ortamında alarak başlayın. Daha sonra, bu hücreleri çok kuyulu bir plakaya tohumlayın ve DCFH-DA çözeltisi ekleyin. Plakayı istenen süre boyunca inkübe edin. DCFH-DA hücre zarını geçer. Hücrenin içine girdikten sonra, DCFH-DA, hücresel bir esteraz enziminin varlığında DCFH'ye dönüşür. Ayrıca, DCFH'nin reaktif oksijen türleri tarafından oksidasyonu yeşil floresan molekülleri verir.
Hücreleri floresan mikroskobu altında gözlemleyin. Yeşil floresan yoğunluğu, hücredeki reakt
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin