JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Kanser Araştırmaları
0 görüntülenme • 3:36 dk. • April 30th, 2023
- Önceden hedeflenmiş radyoimmünoterapi veya PRIT, tümöre özgü bir hücre yüzeyi antijenine karşı yüksek bir afinite sunarken radyoaktif bir ligand'a bağlanan bir immünokonjugat veya bir antikor yapısı kullanır. Ön hedefleme için, serum albümin proteinleri ile tedavi edilmiş bir şırıngada bu antikorların istenen konsantrasyonunu alın. Serum tedavisi bu antikorların şırınga duvarlarına bağlanmasını engeller.
Ardından, kuyruk damarını genişletmek için kolorektal tümör taşıyan bir fare modelini bir ısı lambasının altına yerleştirin. Antikorları genişlemiş damara enjekte edin. Bu immünokonjugatlar tümör bölgesine ulaştıkça, tümöre özgü hücre yüzeyi antijenine olan yüksek afiniteleri, doku içinde birikimlerini teşvik eder.
Daha sonra, uygun bir radyoaktif ligand dozu alın. Radyoligandı önceden hedeflenen farenin genişlemiş kuyruk damarına uygulayın. Bu moleküller tümör bölgesine ulaştığında, antikorlarla birleşirler. Bu ligandların radyoaktif bozunması sırasında yayılan yüksek dozda radyasyon, normal hücrelere maruz kalmayı en aza indirirken hedeflenen tümörü öldürür.
Aşağıdaki protokolde, kolorektal kanserli bir fare modelinde trans-siklookten ile modifiye edilmiş antikorlar ve Lutesyum-177 işaretli tetrazen radyoligandlar kullanılarak önceden hedeflenmiş radyoimmünoterapiyi göstereceğiz.
- Dişi atimik çıplak fareleri kolorektal kanser ksenogrefti ile sıralayın, böylece her kohorttaki ortalama tümör hacmi kabaca eşit olur. Bunu yapmak için, hayvan kimlik numaralarını, kulak çentiği desenini ve tümör hacmini bir elektronik tablo programının üç ayrı sütununda listeleyin. Verileri en küçüğünden en büyüğüne doğru sıralayın. Dördüncü sütunda, her hayvana bir kafes numarası atayın.
Tüm hayvanlar kafese atanana kadar kafesler arasında yılan benzeri bir düzende dolaşın. Kafesler atandıktan sonra, verileri kafes numarasına göre sıralayın. İmmünokonjugatı enjekte etmek için, PBS'de% 1 sığır serum albümini ile önceden muamele edilmiş şırıngalarda 150 mikrolitre huA33-TCO çözeltisi dozları çekin ve bu şırıngaları buz üzerinde saklayın. Radyoligandı enjekte etmek için, önce uygulanan huA33-TCO miktarına göre radyoaktif işaretli Tz-PEG7-DOTA'nın 1.1 molar eşdeğerini içeren 150 mikrolitre% 0.9 steril salin dozları çekin.
Dikdörtgen tümörün en uzun kenarını ve uzunluğa dik olan genişliğini ölçmek için kaliperler kullanın. Zaman içindeki kilo alımını veya kilo kaybını izlemek için her fareyi bir terazide tartın. Son olarak, yüksekliğin yaklaşık olarak genişliğe eşit olduğunu varsayarak, bir elipsoidin hacim formülünü kullanarak hacmi hesaplayın.