Lazer Mikrodiseksiyon: İstilacı Kolorektal Kanser hücrelerini 3D Organotipik Kültür Modelinden İzole Etme Tekniği

- Kolorektal kanserin 3D organotipik modelleri, in vivo tümör mikro ortamlarını taklit etmek için tasarlanmış in vitro kültürlerdir. Kültür genellikle, uygun bir hücre dışı matriks mikroortamında kolorektal kanser epitel hücreleri ile birlikte kültürlenmiş fibroblastlar gibi stromal hücreler içerir.

Yerleşik kültürlerde, metastatik potansiyele sahip tümör hücreleri hücre dışı matrisi istila eder. Bu istilacı hücreleri izole etmek için, önce hücreleri ve hücre dışı matrisi sabitlemek için organotipik modeli formaldehit ile tedavi edin. Numuneyi kurutmak için alkolle inkübe edin.

Ardından, bir doku bloğu oluşturmak için sıvı parafin mumuna gömün. İnce dilimlenmiş bölümler elde etmek için bir ultramikrotom kullanın. Bölümleri uygun bir cam kızak üzerine monte edin.

Bölümleri ayrıştırmak için Ksilen ekleyin. Sırayla, numuneleri yeniden sulandırmak için bölümleri azalan etanol konsantrasyonlarında inkübe edin.

Kolorektal kanser hücrelerini mikro ortamdan lekelemek ve ayırt etmek için Cresyl Violet ile tedavi edin. Vitray slaytı yüzü aşağı bakacak şekilde mikroskop tablasına yerleştirin. Uygun yazılımı kullanarak, mikrodiseke edilecek hücreleri tanımlayın ve sınırları belirleyin. Vurgula