JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Kanser Araştırmaları
0 görüntülenme • 2:44 dk. • April 30th, 2023
- Hücreler, hücre dışı bir matris üzerinde etkili olan mekanik kuvvetler üretir. Bu kuvvete çekiş kuvveti denir. Hücreler, göç ve çoğalma gibi çeşitli görevleri yerine getirmek için çekiş kuvvetleri uygular.
Metastatik kanser hücreleri, sağlıklı hücrelerden daha fazla çekiş kuvveti uygular; bu nedenle, hücrelerin elastik substratlar üzerinde uyguladığı çekiş kuvvetlerini ölçmek için bir çekiş sitometrisi testi yapıyoruz. İstenilen miktarda kolon kanseri hücresini, in vitro ECM'yi taklit eden bir jel olan bir poliakrilamid hidrojel üzerine tohumlayarak başlayın. Jel, hücrelerin yüzeye yapışmasına yardımcı olan fibronektin proteinlerini ve konumsal değişiklikler için bir belirteç görevi gören floresan boncukları içerir.
Hücreleri istenen süre boyunca inkübe edin. Hücreler jele yapışır ve çekiş kuvvetini uygular, bu da floresan boncukların yer değiştirmesine neden olur. Şimdi, plakayı bir floresan mikroskobu altına yerleştirin ve yer değiştiren floresan boncukların bir görüntüsünü alın. Daha sonra, hücreleri ayırmak için plakaya istenen miktarda tripsin ekleyin ve uygun yazılımı kullanarak hücreler tarafından uygulanan çekiş kuvvetini analiz edin. Aşağıdaki protokolde, insan kolon kan
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin