Deneysel Metastatik Melanom Fare Modeli: Akciğerlerdeki Melanom Hücrelerinin Metastatik Potansiyelini İncelemek İçin Bir Platform

- Deneysel metastaz modelleri, intravasküler enjeksiyonu takiben belirli bölgelerde ekstravaze olma ve çoğalma potansiyeli olan tümör hücrelerinin değerlendirilmesine yardımcı olur. Başlamak için, uygun bir ortam kullanarak istenen konsantrasyonda tek hücreli bir melanom hücresi süspansiyonu hazırlayın. Süspansiyonu bir şırıngaya yükleyin.

Ardından, bir fareyi bir odaya yerleştirin ve kuyruğuna erişilebilecek şekilde sabitleyin. Yan damarını görselleştirmek için fareyi 90 derece döndürün. Kuyruk damarını genişletmek için ortam sıcaklığını artırmak için bir ısı lambası kullanın. Şimdi, iğneyi kuyruğun distal ucuna doğru sokun ve hazırlanan melanom hücresi süspansiyonunu genişlemiş damara enjekte edin.

Enjekte edilen metastatik tümör hücreleri dolaşım sistemi boyunca göç eder. Sonunda, bu hücrelerin bazıları dolaşımdan akciğerler gibi uzak organlara ekstravaze olur. Bu tümör hücreleri, çoğalmak ve deneysel metastatik odaklar oluşturmak için yeni mikro çevrelerine adapte olurlar.

Aşağıdaki protokolde, metastatik potansiyellerini incelemek için B16-BL6 melanom hücrelerinin bir fare modeline kuyruk ven enjeksiyonunu göstereceğiz.

- Tüm B16-BL6 hücre süspansiyonları hazırlandıktan sonra bir fare seçin. Kuyruğundan tutarak, hayvanı önce arkaya doğru bir sınırlayıcıya yönlendirin. Farenin gövdesi ana haznede ve kuyruğu aparatın dışındayken, hayvanı tutucunun ucuna doğru çekmeye devam edin.

Ardından, sınırlayıcı pistonu takın ve fare sabitlenene kadar pistonu itmeye devam edin. Hayvan yerine oturduktan sonra, fareyi yanal kuyruk damarlarından biri yukarı bakacak şekilde 90 derece döndürün. Ardından, farenin kuyruğunun damarın en görünür olduğu tarafını kuvvetlice temizlemek için bir alkollü ped kullanın.

Enjeksiyona hazırlanmak için önce mililitre süspansiyon başına 0,5 milyon hücrenin 300 mikrolitresini bir şırıngaya toplayın. Daha sonra, şırıngayı ters çevirerek, yan tarafına hafifçe vurarak ve pistonu iterek kabarcıkları çıkarın. Kabarcıklar çıkarıldıktan sonra, şırıngada 250 mikrolitrelik bir son hacim elde etmek için hücre kültürünü çıkarın.

Baskın olmayan el ile fare kuyruğunu uzatmaya devam edin. İşaret parmağı kuyruğun proksimal ucunu yükseltecek ve başparmak distal kısmı bastıracak şekilde tutun. Baskın el ile, iğneyi kuyruğun distal ucuna doğru, aşağı doğru bir dakika açıyla damar içine sokun. Ardından, iğneyi kuyruk damarının açısına uyacak şekilde ayarlayarak daha fazla sokun

İğne yerleştirildikten sonra, kuyruk damarına yaklaşık 1 santimetre, şırıngayı sabit tutarken pistonu itmeye başlayın. Gazlı bezi giriş bölgesine doğru tutarak herhangi bir kanamayı durdurun. Hücre süspansiyonu çıkarıldıktan sonra, iğneyi damardan çıkarın ve atın. Ardından, pistonu sınırlayıcıdan çıkarın ve fareyi bir alıcı kafesine yerleştirin.

• Experimental metastasis models - Tools to evaluate tumor cells' propensity to extravasate and proliferate following intravascular injection.
• Melanoma - A potent type of skin cancer that can spread to other organs like the lungs.
• B16-BL6 melanoma cells - Specific melanoma cells used in research for their metastatic potential.
• Tail vein injection - Technique to introduce substances directly into the bloodstream for experimental purposes.
• Metastatic foci - The sites where cancer cells adapt, proliferate and establish after traveling from the original tumor site.

• Melanoma metastasis - This describes how melanoma cells spread from the primary site to other parts of the body (e.g., lungs).
• Basics of tail vein injection - This procedure is a method of administering substances directly into the bloodstream (e.g., B16-BL6 melanoma cells).
• Metastatic foci formation process - This describes how injected cancer cells adapt to new environments, leading to metastasis.
• Link to mouse model - B16-BL6 melanoma cells are injected into a mouse model to study their metastatic potential.

• What is melanoma and how does it metastasize to the lungs?
• What is the purpose of tail vein injection in the metastatic model?
• How do melanoma cells form metastatic foci in distant organs?

• Targeted cancer treatments - Understanding metastasis could guide development of targeted therapies (e.g., for melanoma).
• Cancer research - The B16 mouse model aids in understanding cancer spread (e.g., melanoma metastasis).
• Medical advancements - Learning about metastasis contributes to treating other metastatic cancers (e.g., lung metastasis).
• Innovations in metastasis study - The study of metastasis helps in improving cancer diagnosis and prognosis methods.