JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Kanser Araştırmaları
0 görüntülenme • 5:54 dk. • April 30th, 2023
- Cilt, farklı katmanlarını dolduran çeşitli hücrelerden oluşur. Melanin üreten hücreler olan melanositler, epidermal-dermal bileşkede lokalize olurken, bağ dokusu üreten hücreler olan fibroblastlar dermiste bulunur.
Melanositleri ve fibroblastları hızlı bir şekilde izole etmek için, ötenazi yapılmış bir fare yavrusunun gövdesini alarak başlayın. Cildi gövdenin uzunluğu boyunca ventral olarak kesin. Epidermal ve dermal tabakayı içeren cildi soyun ve dokuyu küçük parçalar halinde kıyın.
Şimdi, hücre dışı matrisi bozan ve hücreleri süspansiyona bırakan tripsin ve kollajenaz enzimleri içeren bir sindirim tamponu ile tedavi edin. Hücreleri peletlemek ve süpernatanı atmak için santrifüjleyin. Melanosit ortamındaki hücreleri yeniden süspanse edin ve süspansiyonu çok kuyulu bir plakaya aktarın.
Kültür sırasında, fibroblastların çoğu kuyu dibine yapışırken, melanositler ve diğer epidermal hücreler süspansiyon halinde kalır. Askıda kalan hücreleri aspire edin ve büyümelerini teşvik etmek için fibroblast kültürüne fibroblast spesifik ortam ekleyin. Yapışkan bir kültürün oluşumuna yardımcı olmak için aspire edilmiş süspansiyonu taze kollajen kaplı bir kuyuya aktarın.
Bir antibiyotik olan gene
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin