JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Kanser Araştırmaları
0 görüntülenme • 5:05 dk. • April 30th, 2023
- Tahlillere başlamak için önce askorbik asit ile takviye edilmiş bir fibroblast hücre süspansiyonunu bir kuyu plakasına pipetleyin ve inkübe edin. Askorbik asit fibroblast proliferasyonunu arttırır. Aynı zamanda doğal ECM bileşenlerinin salgılanmasını uyarır, böylece çoğalan hücreleri kalın hücre dışı matrise gömer.
Matrisi plaka yüzeyinden yavaşça serbest bırakın ve ortamda yüzmesine izin verin. Matris büzülür ve daha fazla matris birikimi ve yeniden şekillenme ile kalınlaşır, bu da doğal dermise benzeyen bir dokuya yol açar. Matrisi gözenekli bir ağ üzerine yayın. Daha sonra, epitel kanseri hücrelerini matris üzerine tohumlayın ve hücrelerin yerleşmesi ve bağlanması için kuluçkaya yatırın.
Düzeneği, bir tabakta önceden monte edilmiş örgülü bir platforma aktarın. Yukarıdaki hücreler için bir hava-sıvı arayüzü oluşturmak için matrisin sadece alt katmanını desteklemek için medya ekleyin. Kültür sırasında arayüz, tümör hücrelerinin çoğalmasını ve farklılaşmasını teşvik eder. Hücreler ayrıca ECM'yi bozan, matrise göçlerini ve istilalarını kolaylaştıran proteazlar salgılar.
Aşağıdaki protokolde, primer stromal fibroblastlardan türetilen doğal bir matris üzerinde kutanöz skuamöz hücrel
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin