Minimum Eritematöz Doz Deneyi: Fare Modellerinde UV Duyarlılığını Ölçmek İçin Bir Yöntem

0 görüntüleme5:14 dk • April 30th, 2023

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

- Melanositler, zararlı UV radyasyonlarını emen ve cildi koruyan eumelanin adı verilen koyu bir pigment üretir. UV hassasiyetini ölçmek için, anestezi uygulanmış bir fare modeli alarak başlayın. Epidermal tabakayı ortaya çıkarmak için sırt kürkünü çıkararak fareyi hazırlayın. Açıkta kalan cilt üzerinde belirli sayıda delik taşıyan bir UV bloke edici bant parçasını sabitleyin. Açıklığı maskelemek için biri hariç tüm deliklerin üzerine küçük çıkarılabilir bantlar sabitleyin.

Şimdi, fareyi istediğiniz süre boyunca UV radyasyonuna maruz bırakın. Maruz kalma süresi boyunca, önceden belirlenmiş zaman noktalarında kalan delikleri sırayla açın. Bu, art arda maruz kalan cilt yamalarının azalan UV radyasyonu dozlarını almasını kolaylaştırır. Delikler, UV ışınlarının farenin epidermisine lokalize olarak nüfuz etmesine izin verir.

Maruz kaldıktan sonra, epidermal hücreler pro-inflamatuar molekülleri serbest bırakır. Bu moleküller dermise doğru yayılır ve dermal kan damarlarını genişleterek kızarıklığa veya ciltte kızarıklığa neden olur. Daha sonra, lökositler dermise sızar ve maruz kalan bölgede ödem veya şişmeye neden olur.

Deneysel bitiş noktasında, radyasyonu durdurun ve kızarıklık ve ödemi gözlemlemek için bandı çıkarın. Aşağıdaki protokolde, Minimum Eritemli Dozu belirleyerek forskolin - melanin üreten bir ilaç - ile tedavi edilen insanlaştırılmış bir fare modelinde UV duyarlılığını ölçeceğiz.

- Minimal Eritemli Dozu veya MED'i belirlemek için, her hayvan çeşitli UV dozlarına maruz kalacaktır. Bantta delikler açmak için 1 santimetre kare dairesel oyuğa sahip ağır hizmet tipi bir delgeç kullanarak bir parça UV tıkayıcı bant hazırlayarak başlayın. Banttaki her deliğin üzerine, UV ışınlarına maruz kalmak için çıkarılabilen küçük ama kolayca çıkarılabilir bir bant parçası uygulayın. Bandı anestezi uygulanmış farenin sırt yüzeyine yerleştirin.

Hayvanın gözleri açıksa, kuruma ve UV ışınlarına maruz kalmaktan kaynaklanan yaralanmaları önlemek için suni gözyaşı uygulayın. 313 nanometre tepe çıkışına ve 280 ila 370 nanometre aralığına sahip iki UVB lambasından oluşan UV kaynağını açın. Çıkışı doğrulamak için UVB sensörlü bir UV fotometre kullanmadan önce lambanın sabit bir UV çıkışına dengelenmesini bekleyin.

UV fotometre tarafından ölçülen UV iletim hızına bağlı olarak, istenen her doz için UV'ye maruz kalma süresini hesaplayın. Örneğin, lambanızın UVB çıkışı santimetre kare başına 2,4 miliwatt ölçer. Bu nedenle, metrekare başına 5 kilojul uygulamak için cildin burada hesaplandığı gibi 208 saniye UVB radyasyonuna maruz kalması gerekir.

Ardından, eşit UV maruziyetini sağlamak için sedasyonlu hayvanın ventral yüzeyini aşağı yerleştirin. Seçilen radyasyon dozunu uygulamak için, delikleri kaplayan küçük bant parçalarını uygun zamanda sırayla çıkarın.

Örneğin, metrekare başına 40 kilojul en büyük doz ise, fare 27 dakika 47 saniye boyunca lambanın altında kalacak ve bu doz için delik baştan açığa çıkacaktır. Bununla birlikte, metrekare başına 5 kilojul koşulu için, bant 208 saniyelik maruz kalma süresi ile çıkarılacaktır. UV ışınlarına maruz kaldıktan sonra, bandı dikkatlice çıkarın ve hayvanları kafeslerine geri koymadan önce anesteziden kurtulmaları için sıcak ve sessiz bir yere koyun.

Minimal Eritematöz Doz veya MED değeri, maruz kalan tüm cilt döngüsünün eritem ve / veya ödemi ile tanımlanan iltihaplanmaya neden olan minimum UV dozuna karşılık gelir. UV'ye maruz kalan alanlarda ayrı eritem veya ödem alanları aramak için fareyi 24 ila 48 saat boyunca izleyin.

Bazen, artık kürk anız, altta yatan deri eritemini veya ödemini maskeleyerek MED testinin yorumlanmasını karıştırır. Cildi %70 etanol ile ıslatmak cildi çok daha yorumlanabilir hale getirir. Herhangi bir deri bulgusunu fotoğrafik olarak belgeleyin ve ardından fareleri hayvan tesisine geri koyun.

06:24

Minimal Eritem Dozu (MED) Test

İlgili videolar

0 Görüntüler

06:41

Tahliller UV yansıtan Yapıları Algılama ve Sailfin Molly kullanarak Mate Tercihi kendi Önemi belirleme Poecilia latipinna

İlgili videolar

0 Görüntüler

08:17

Çevirisel İmmüno-onkoloji (I-O) Araştırma için İnsani Periferik Kan Mononükleer Hücre (PBMC) Engrafted Humanized Xenograft Modeli

İlgili videolar

0 Görüntüler

03:59

PDT'nin İn Vivo Antitümör Etkinlik Analizi: Tümör Taşıyan Farelerde Bir Fotosensitizörün Fototoksik Potansiyelini Belirleme Tekniği

İlgili videolar

0 Görüntüler

12:37

Bir Insanlaşmış Fare Modeli epidermal melanin ve Karşı Koruma yanığı Farmakolojik İndüksiyon

İlgili videolar

0 Görüntüler

07:49

Farelerde Yerel Anafilaksi Ölçme

İlgili videolar

0 Görüntüler

06:21

Bir fare Modeli Kullanılarak Akut Radyasyondan Bağlı Cilt zehirlilik Kantitatif Değerlendirme optik tayf Diffüz

İlgili videolar

0 Görüntüler

09:38

Bir Entegre, Multi-Modal Ağrı Görev Kullanma Pil Ağrı Algılama ve Tolerans eşikleri Belirlenmesi

İlgili videolar

0 Görüntüler

06:31

İnsan İnflamatuar Yanıtında Bireysel Değişimi Değerlendirmek Için Minimal Eritem Dozu (MED) Testinin Hassas Uygulanması

İlgili videolar

0 Görüntüler

12:59

Ultraviyole-C (UV-C) Hasarına Yanıt Olarak Birincil Fare Oküler Yüzey Hücrelerinde/Kök Hücrelerinde Oksidatif Hasarın Değerlendirilmesi

İlgili videolar

0 Görüntüler

Son güncelleme: 1 Ağustos 2026