Sivrisinek Yetiştirme Protokolü (A. gambiae)

Benim adım Shish ve John Hopkins Halk Sağlığı Okulu'nda Dr.George OU'nun laboratuvarında doktora sonrası araştırmacıyım. Moleküler Mikrobiyoloji ve İmmünoloji Bölümü'nde, phis Gambi'nin sivrisineklere nasıl yetiştirileceğini göstereceğim. Laboratuvarda, genellikle 27 santigrat derecede ve% 80 nemde tutulan sektör odasında muhafaza ediyoruz.

Sektör içi oda da 12 saatlik gündüz gece çemberi içinde tutulmaktadır, böylece doğal koşullardaki koşulları taklit edebiliriz. İşte bu, sahip olduğumuz Insectory odası, buradaki çekirdek bir tesis, bu böceğin bakımını yapıyor. Gördüğünüz gibi, bunlarda sivrisineklerin tüm farklı aşamalarında, yumurtada, larvaların farklı aşamalarında ve gözetlemede bulunan tüm farklı tepsiler var.

Bu tepsilerde 11 veya 12 günlük larvalar var ve burası yetişkin sivrisinekleri topladığımız ve% 10'luk sükroz çözeltisini koruduğumuz bir kafes. Sivrisinek giymeye başlamak için, sivrisinekleri kanla beslememiz gerekiyor çünkü sivrisinekler, yumurta bırakmak için kanın proteinine ihtiyaçları var. Yani birinci gün, yetişkinlerin bir kafeste toplanmasından ve %10 sükroz ile beslenmesinden sonradır.

Birinci gün sivrisinekleri kanla beslemektir ve bu yüzden yapay zar kanla beslenir. Bu, sivrisinekler için zar beslemesi için kullandığımız bir cam besleyicidir. Gördüğünüz küçük delikten kanı içeriye koyuyoruz ve kanı o deliğin içinde yer alıyor.

Yan taraftaki altta, 37 derecede tutulan bir su doğumuna bağlı iki nozul vardır. Kanı 37 ° C'de sıcak tutmak, besleyiciyi beslenmeye hazırlamak için küçük bir tehlike alıyoruz. İki uçtan dört taraftan da geriyoruz ve sonra bunu cam besleyicinin açık tarafına koyuyoruz, böylece cildi taklit edecek şekilde ince bir zar tabakası oluşturuyoruz.

Buna zar besleme denir. Bu, suyu 37 ° C'de tutan ve aynı zamanda suyu cam besleyiciden dolaştıran ve böylece kanın 37 ° C'de ılık olarak çimentolaşmasını sağlayan bir sirkülasyonlu su banyosudur. Bu yüzden cam besleyiciyi küçük kılcal damarlardan geçiriyoruz ve bunu sirkülasyon halindeki su banyosuna bağlıyoruz ve su banyosunu açıyoruz, böylece su dolaşıyor ve su ve kan iki ayrı odacıkta oldukları için asla karışmıyorlar.

Bu Phis Gambi yetişkin sivrisineklerinin bir kafesi. İşte bu, dolaşım banyosuna bağlı olan cam besleyici ve kafesin üstüne bir kelepçe koyduk ve 200 mikrolitre kan ekliyoruz. Kafeste hem erkek hem de dişi sivrisinekler bulunur.

Kanla beslenmeye gelen sadece dişidir. Beslemeye yaklaşık 30 dakika devam edilir. Kan beslemesinden iki gün sonra, sivrisineklerin yumurtalarına yumurtaların içine yumurta kapları koyuyoruz.

Bu nasıl yapılır. Küçük bir tane alıyoruz, kısmen biraz damıtılmış su ile dolduruyoruz, bir ne alıyoruz ve kağıdı dolduruyoruz, sonra konik bir şekilde sarıyoruz ve bunu damıtılmış suyu içeren behere koyuyoruz ve inda biberinin molandığından emin oluyoruz. Şimdi yavaş yavaş sivrisinek kafesini açıyoruz, sivrisineklerin dışarı çıkmasına izin vermemeye özen gösteriyoruz ve yumurta kaplarını içine koyuyoruz.

Bardaklar kafesin içine konulduktan sonraki gün yani dördüncü gün yavaş yavaş kafesten çıkarılırlar. Ve bunlar yumurtalar, siyah olanlar, ayrıca bazı ölü sivrisinekler de var. Yumurtaları hazırladıktan sonra plastik bir tepsiye koyun.

Geçmişte, plastik tepsi damıtılmış su ile doldurulur. Süzme biberi yumurtalarla birlikte alın ve dışarı koyun. Ayrıca öğütülmüş balık yemi olan A adlı bir tutam yiyecek ekliyoruz ve tepsiyi rafa koyuyoruz.

Tepsiyi başlattığımız gün tepsiyi düzleştirmeliyiz ve ayrıca burada hangi türler olduklarını. Bu Senden sonra, bu yumurtayı tepsiye koyduktan sonraki gün. Yani, bunlar bir günlük, ancak gerçek protokol sivrisinek gününün beşinci günüdür.

Bunlar siyah olanlar, larvalara yumurtadan çıkacak olan yumurtalardır. Ve bunlar sivrisinek yemi. Sivrisinek yetiştiriciliği için genellikle üç farklı türde yiyecek kullanırız.

A yiyeceği aslında öğütülmüş balık yemi, ve bu, bu mamayı sivrisinek kültürüne başladığımızda, X aşamasındayken, her gün iki tablet mama ekliyoruz, C, Purina'dan alınan kedi maması. Sekiz veya dokuz gün sonra tepsinin suyunu değiştirip taze su veriyoruz. Ve o zaman, A yiyeceği yerine, bir tutam B yiyeceği ekliyoruz, ki bu öğütülmüş gıdadan başka bir şey değil, C yiyeceği, yani topraklanmış kedi maması, ayrıca iki tablet C yiyeceği, yumurtalar, larvalara kuluçka ekliyoruz.

Ve larvaların üç farklı aşaması vardır. İlk yüklemede, İkinci yüklemede ve üçüncü yüklemede. Bunlar larvaları olan tepsiler, Beş ya da altı günlük.

Bu Ravi, çok daha sonraki bir aşamada, dokuz ila 10 günlük gibi. Arada su değiştirildi ve taze su eklendi ve taze yiyecekler eklendi. Bu tepside hem Yetişkinler hem de KKD bulunur.

Bunlar, gördüğünüz gibi, cibinliklerin altında uçan yetişkinler. Ve kenarda, yetişkinlere Hatch'e gidecek olan tüm koyu renkli KKD'leri görebilirsiniz. Yetişkinlere sahip olduğunuzda, şuna benzeyen bir kafeste toplanmaya hazırlar.

İçinde bir kağıt havlu astarı ve% 10 süper çözelti içeren küçük bir şişe ve sivrisinekler için bir besin kaynağı olarak hizmet edecek bir pamuklu sabun tenekesi vardır. Bu yüzden kapağı kapattık ve bu aparat, aspiratör, bu tepsilerden yetişkinleri toplayacak olan vakuma bağlı. Aspiratörün bu kısmı buraya bağlıdır ve diğer ucundadır.

Vakuma bağlı. Kafesi yerleştiriyoruz, yetişkinleri bu küçük kutuya toplayacağız. Bu, sivrisinek tepsisinin içine yerleştirilecek uzun bir tüpe sahip olan aspiratörün başka bir parçasıdır.

Diğer taraf kafese bağlanacaktır. Her şeyin sıkı olduğundan ve vakumun iyi çalıştığından emin olmalısınız. Kapağı kapatıyoruz ve her şeyin sıkı olduğundan emin oluyoruz.

Arka ucu yavaşça başlatın. Kurulum hazır olduğunda, bu uzun boruyu yavaşça sivrisinek tepsisinin içine koyuyoruz, ağı kapattığınızdan ve sivrisineklerin gevşemesine izin vermediğinizden emin oluyoruz. Ve gördüğünüz gibi, sivrisinekler küçük kafeste toplanıyor.

Tüm yetişkinleri toplamak için pipoyu yavaşça her yere götürün. Şimdi neredeyse bitirdim. Tüm yetişkinler toplandı ve hepsi gördüğünüz gibi bu kafesin içindeler.

Sonra yavaşça vakumu serbest bırakıyoruz ve toplama aparatını söküyoruz. İşte bu Ana Gambi yetişkin sivrisinekleri, birkaç gün bu kafeste kalacaklar. % 10 sükroza uyacaklar ve ancak o zaman Yumurta bırakmamız gerektiğinde uymaları için kan verilecek.

Az önce size Sivrisinekleri nasıl giyeceğinizi gösterdim. Finis mb sivrisineklerin laboratuvar koşullarında, kanın uydurulması kelimelerinde önemli adımlar atılmıştır. Daha sonra yumurta kaplarını koyup yumurtaları takip edin ve ardından larvalar, kkd ve yetişkinler gibi farklı aşamalardan geçerler.

Ve son olarak, yetişkinleri topluyoruz. Bu tekniğin önemi, sağlıklı sivrisineklere sahip olmak için doğal koşullarda dışarıda bulunan koşulları taklit etmemiz gerektiğidir ve sonra onları plazmodyum ile enfekte ederiz ve sıtma üzerinde farklı türde çalışmalar yaparız, ki asıl amaç malları dünyadan yok etmektir.