Name: Bal arısı burnumun Extension Tepki Klasik Koşullanma Davranış Farmakoloji ( Apis mellifera) (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-01-24T17:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 36 s
Description: Öğrenin, klasik koşullanma ve ilaç uygulamaları kullanarak Apis mellifera'da öğrenme ve bellek oluşumunun moleküler mekanizmalarını incelemeyi. Bu yöntem davranışsal farmakoloji araştırmaları için güvenilir bir model sunar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

DE Öğrenme (BFNL) Nöronal Temeli Randolf Menzel yazının önceki bir sürümüne değerli yorumları için teşekkür ediyorum: Bu çalışma, Alman Federal Eğitim ve Araştırma (BMBF) Bernstein Odak içinde Bakanlığı hibe tarafından desteklenmiştir.

1. Hive yakalamak arı <ol><li> 2 ve 16:00 arasında, deney başlamadan bir gün önce, arıların kovanı terk yakalanmış. Bunu yapmak için, UV ışık geçirgen pleksiglas piramit (yükseklik = 30 cm, apeks 3,5 x 3, 5 cm, taban 18 x 18 cm), apeks ve baz kapaklı, 20 düzenleniyor baz açık ve apeks ile kovan girişinin önünde 30 cm mesafe arıların kovanı terk piramidin tabanına girmek o kadar kapalı. Taban sonra kapalı ve yakalanan arılar daha fazla kullanım için laboratuvar haline getirilir. </li></ol> 2. Cam şişeler içine Piramit arı aktarma <ol><li> Laboratuarda, piramidin tabanı üzerinde yer almaktadır. Piramidin duvarları kararmış (örneğin bir havlu ile), fakat apeks bırakıldığı. Çünkü olumlu phototaxis, arılar açıldığında apeks ile piramit bırakacaktır. Bir tek, arılar açık apeks üzerine şişeleri tutarak piramit cam şişe içine transfer edilir. Bir flakon arı başına kullanılır. Bu nedenle, apeks bir arı flakon girdiğinde kapalıdır. </li></ol> 3. Tüpler Harnessing arı <ol><li> Arılar 2.5-3.5 dakika buz cam şişe soğutma immobilize. Arı izlemek ve en kısa sürede durduğu buz kaldırmak için tavsiye edilir. </li><li> Immobilize tek bir arı burnumun özgürce değil, kafa, toraks veya bacaklarda hareket etmek mümkün olduğu gibi yapışkan bant ile küçük bir plastik tüp, koşulmuştur. Boyun sıkıştırılmış olmadığı önemlidir. </li><li> Her arı plastik bir tüp içinde sabit, daha iyi yol tutuşu ve tanımlama için bir raf numaralı kuyu içi içine konur. Klima ya da hafıza alımı için tüp çıkarıldıktan sonra her zaman tam olarak aynı Kuyu döndü. </li></ol> 4. Besleme arı <ol><li> Ilk akşam (4-6 pm), yakalanmadan sonra, arılar, sakkaroz çözeltisi (0,88 M, musluk suyu içinde çözünmüş rafine beyaz ev şeker) ile doyma beslenir. Bir arı beslemek için, PER sukroz solüsyonu ile antenlerine değdirerek ve hayvan sakaroz çözeltisini bir damlacık (4 mcL) harcamasına izin tarafından ortaya. Onların antenleri sakaroz çözeltisini dokunduğu zaman artık hızlı ve güvenilir bir BAŞINA göstermek kadar arı sürekli birbiri ardına beslenir. </li><li> Deney arıların sonraki her akşam (4-6 pm) 1 damlacık sakaroz çözeltisini (4 mcL, 0,88 M, musluk suyunda çözülmüş rafine beyaz şeker) ile başka bir dört kez ardına beslenir. Sakaroz çözeltisini, beslenme sırasında arı antenler veya burnumun ve tüpler, sukroz solüsyonu ile kontamine değildir bulaşmış olduğu önemlidir. Arılar sakaroz stimulus ile eğitim bağlamında ilişkilendirerek olasılığını dışlamak için klima yerinde veya yakınında verilmemelidir. </li></ol> 5. Harnessed arı Gecelik tutmak <ol><li> Arılar oda sıcaklığında bir gece boyunca plastik bir kabın içinde muhafaza edilir. Musluk suyu kase (yaklaşık 0,5-1 cm yüksekliğinde) doldurulur. Harnessed arılar Raflar ELISA plakaları bir platform olarak kullanarak su üstündeki kase yerleştirilir. Son olarak, kase karton ile kaplıdır. </li></ol> 6. Olfaktör İklimlendirme Deneyin ilk sabah (sabah 10), koku alma klima yürütülmektedir. Şartlı uyaran (CS) bir koku, koşulsuz uyaran (US) sakaroz çözümdür. <ol><li> Koku (örneğin karanfil yağı) 4 mcL sonra 20 ml şırınga eklenir yuvarlak filtre kağıdı (1,3 cm çap) üzerine pipetlenir. Koku, bir başlık altında pipetlenebilir ve filtre ipuçları pipet kirlenmesini önlemek için kullanılır. </li><li> Harnessed arılar ile raf Klima sitesi 30 dakika yakın yerleştirilir klima prosedürü başlamadan önce, ama bir mesafeden tek arılar klimalı bir egzoz borusunun önünde yer. </li><li> Şartlandırma 10 dakika arası bir deneme aralığı (ITI) ile üç koku eşleşmeleri (şartlı uyaran, CS) ve sukroz solüsyonu (koşulsuz uyaran, ABD, 1,25 M) oluşur. Bir akustik sinyal ses çalar üzerinden deneyci teslim uyaran başlangıçlı, uyaran ofset, uyaran süresi ve yerleştirme hassas zamanlama sağlar. Bir kazanım deneme hayvanın bir egzoz önünde 10 sn yerleştirme ile başlar. 10 saniye sonunda kısa bir süre önce koku içeren şırınga arı arı Kullanıcı antenler hedef önünde 3 cm yerleştirilir. Daha sonra, koku 20 ml şırınga ile hava basarak, 5 saniye için sunulmuştur. Ilk 3 saniye sonra her iki anten distal kamçı, kürdan ve hayvanlar 4 sn moistend kürdan yalamak için izin çözüm nemlendirilmiş bir sakaroz ile dokundu. 13 saniye CS stimülasyon biter, arılar sonra eğitim bağlamında alınır ve geri rafa yerleştirilir. Toplamda bir eğitim deneme 28 sn sürer. Arı antenleri, ne de burnumun ne Klima sonra sakaroz ile kaplı olduğu önemlidir. Bu nedenle kürdan sadece sukroz solüsyonu ile ve kürdan sakaroz çözeltisini formu herhangi bir damla olduğunu nemlendirilmiş olduğunu sağlanmalıdır. </li><li> Klima sonra rafları kase içinde geri yerleştirilir. </li><li> Deney sırasında hayvanların davranışlarını, yani yerleştirme ve CS ve ABD sunum sırasında BAŞINA oluşumu izlenir ve deneyci tarafından not. </li></ol> 7. Bellek Tutma <ol><li> Tutma testleri, herhangi bir zaman aralığı (gün dak) yapılabilir. Hafıza testi başlamadan önce arılar ile raf Klima sitesi 30 dakika yakın yerleştirilir. </li><li> Bir bellek testinde, ABD sunum olmadan 5 sn CS sunum oluşur. Egzoz önünde 10 sn hayvan yerleştirme testi ile başlar. Daha sonra, yukarıda açıklandığı gibi koku 5 sn sunulmuştur. Hayvan davranışı, yerleştirme sırasında yani BAŞINA oluşumu ve CS sunum, deney sırasında not. </li><li> Deneyin sonunda burnumun genişleme yanıt yine hayvan hala burnumun uzatmak mümkün olduğundan emin olmak için, sukroz solüsyonu ile antenlerine değdirerek tarafından ortaya. </li></ol> 8. Sistemik Enjeksiyon Sistemik enjeksiyon zaman noktası, deneysel tasarım bağlıdır. <ol><li> Küçük bir delik, bir tek derialtı iğne (21 G) kullanarak uçuş kas 17 Yukarıdaki scutal fissür yanında scutum arka kısmının cuticula yapılır . </li><li> Cam bir kapiler tüp kullanarak, 1 mcL çözüm uçuş kas içine cuticula delikten enjekte edilir. Eğitimli deneyciler enjeksiyon ve klima hassas bir zamanlama sağlayan, her 30 saniyede bir arı enjekte etmek mümkün. </li></ol> 9 - Deney sırasında Besleme arı <ol><li> Klima sonra akşam (4-6 pm), arılar sakaroz çözeltisini 1 damlacık (4 mcL, 0,88 M, musluk suyu içinde çözünmüş rafine beyaz şeker) ile başka bir dört kez ardına beslenir. Sakaroz çözeltisini, beslenme sırasında arı antenler veya burnumun ve tüpler, sukroz solüsyonu ile kontamine değildir bulaşmış olduğu önemlidir. Arılar sakaroz stimulus ile eğitim bağlamında ilişkilendirerek olasılığını dışlamak için klima yerinde veya yakınında verilmemelidir. </li></ol> 10 Veri Toplama ve Veri Analizi <ol><li> Deney sırasında probosis uzantısı yanıt oluşumu izlenmektedir. Bu, açık kısaydı bir sanal hattı geçerken, CS ve ABD'nin sunumu (eğitim sırasında) başlangıcı arasındaki veya CS sunum sırasında (test aşamasında) burnumun uzanır bir arı olumlu puan aldı. </li><li> Analiz hayvanlarda dahil olmak için iki kriterin yerine getirilmesi gerekir: tüm deney hayatta gerekir ve bu deney sonunda sakaroz çözeltisini koşulsuz burnumun uzantısı yanıt (PER) göstermek zorundadır. Her CS tanıtımı için satın alma ve saklama testleri sırasında BAŞINA gösteren arıların yüzde çizilir. </li></ol> 11. Temsilcisi Sonuçlar: İki deneyleri burada sunulmaktadır. Ilk deneyde, fosfat tamponlu salin (PBS sistemik enjeksiyonu etkisi bakmak; mM: 137 NaCl, 2,7 KCl, 10,1 Na 2 HPO 4, 1,8 KH 2 PO 4, pH 7 , 2) uzun vadeli öğrenme ve bellek oluşumu. Arıların üç gruba 10 dakika arası bir deneme aralığı ile üç CS-ABD eşleşmeleri ile eğitilmiştir olmayan bir tedavi edilen grup, bir grup eğitim öncesi 1 mcL PBS 30 dakika ile enjekte edildi ve sahte-enjekte edilen grupta tedavi PBS-enjekte edilen bir grup olarak değil, PBS enjekte etmeden aynı şekilde. Eğitim bellek 24 saat sonra her üç grupta da bir CS sunumu ile test edildi. Klima sırasında şartlı tepki gösteren hayvanların yüzde üç eğitim çalışmalar boyunca önemli ölçüde artar (Şekil 1, faktör kez tekrarlanan ölçüm için ANOVA F 2378 = 340.456, p &lt;0.05). PER fark yok (ANOVA faktör grupları F2, 189 = 1,299, p&gt; 0,05 için tekrar ölçümü için) Klima sırasında üç grup arasında gözlenen olabilir. PBS-enjekte edilen ve plasebo-enjekte edilen hayvanların arıtılmamış hayvanlar karşılaştırırken bu 24 saat tutma testi (F2, 187 = 0.752, p&gt; 0,05) için de geçerlidir. Ikinci deneyde üç bellek tutma inhibisyonu ve protein sentezi inhibitörü anisomycin (10 mM) sistemik üç CS-ABD eşleşmeleri 30 dakika sonra enjekte edildi eğitim dört gün sonra göstermektedir. PBS-enjekte edilen bir grup ile bir anisomycin enjekte grubun karşılaştırılması t tutma sırasında gruplar arasında önemli bir fark ortayaest (Şekil 2, faktör grup F1, 94 için tekrar ölçümü için ANOVA = 8,86, p &lt;0.05). Bir önemli fark, günde 3 ve 4. günde hafıza testi görülebilir. Bu Wüstenberg ark sonuçları benzer 18, farklı bir protokol ile de olsa, üç CS-ABD eşleşmeleri arılar klimalı kim. <img src="/files/ftp_upload/2282/2282fig1.jpg" alt="Şekil 1" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Şekil 1"> Şekil 1. PBS Cuticula lezyon veya enjeksiyon satın alma ve bellek tutma değiştirmez. Hayvanlar üç CS-ABD eşleşmeleri (satın alma) ile eğitilmiştir. 24 saat sonra, bellek (Memory Tutma) test edildi. Otuz dakika eğitim öncesinde, bir delikten iki grup arasında cuticula yapıldı (lezyon, PBS) ve bu gruplardan birine 1 mcL PBS (PBS) ile enjekte edildi. Üçüncü grup (tedavi) değişmeden kalır. Sunan hayvanların her grup BAŞINA koku sunum yanıt yüzdesi. Satın alma aşamasında gruplar arasında anlamlı farklar ortaya bir ANOVA (F2, 189 = 1,299, p&gt; 0.05) veya bellek saklama (F2, 187 = 0,752, p&gt; 0.05). Değildir <img src="/files/ftp_upload/2282/2282fig2.jpg" alt="Şekil 2" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Şekil 2"> Şekil 2. CS-ABD son eşleşme 40 dakika sonra anisomycin enjeksiyon bellek tutma üç gün ve dört gün sonra eğitim azaltır. Hayvanlar üç CS-ABD eşleşmeleri (satın alma) ile eğitimli ve 1 mcL 10 mM anisomycin (Aniso) veya 1 mcL PBS ile enjekte edildi 1 saat sonra ilk eğitim çalışması. Bellek (Hafıza Tutma) 24 saat, 48 saat sonra, 72 saat ve 96 saat test edildi. Sunan bir BAŞINA koku sunum yanıt grup başına hayvanların yüzdesi. Anisomycin enjeksiyon eğitim bellek tutma 72 saat ve 96 saat sonra önemli bir azalma (F1, 94 = 8.86, p &lt;0.05) bir ANOVA ortaya koyduğu gibi yol açar.

<ol><li>Menzel, R., Giurfa, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cognitive+architecture+of+a+mini-brain%3A+the+honeybee%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+Cogn+Sci%22%5BJournal%5D)">Cognitive architecture of a mini-brain: the honeybee.</a> Trends Cogn Sci. 5, 62-71 (2001).</li>
<li>Menzel, R., Leboulle, G., Eisenhardt, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Small+brains%2C+bright+minds%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Small brains, bright minds.</a> Cell. 124, 237-239 (2006).</li>
<li>Menzel, R. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aMenzel%2C+R+%22Neurobiology+of+comparative+cognition%22">Neurobiology of comparative cognition</a>. Kesner, R. P., Olton, D. S. , Lawrence Erlbaum Associates Publishers. Hillsday, New Jersey, Hove, London. (1990).</li>
<li>Bitterman, M. E., Menzel, R., Fietz, A., Schafer, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Classical-Conditioning+of+Proboscis+Extension+in+Honeybees+%28Apis-Mellifera%29%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Comp.+Psyc%22%5BJournal%5D)">Classical-Conditioning of Proboscis Extension in Honeybees (Apis-Mellifera).</a> J. Comp. Psyc. 97, 107-119 (1983).</li>
<li>Menzel, R., Muller, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Learning+and+memory+in+honeybees%3A+from+behavior+to+neural+substrates%5BTitle%5D)+AND+%22Annu.+Rev.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Learning and memory in honeybees: from behavior to neural substrates.</a> Annu. Rev. Neurosci. 19, 379-404 (1996).</li>
<li>Menzel, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Memory+dynamics+in+the+honeybee%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Comparative+Physiology+A-Neuroethology+Sensory+Neural+and+Behavioral+Physiology%22%5BJournal%5D)">Memory dynamics in the honeybee.</a> Journal of Comparative Physiology A-Neuroethology Sensory Neural and Behavioral Physiology. 185, 323-340 (1999).</li>
<li>Menzel, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Searching+for+the+memory+trace+in+a+mini-brain%2C+the+honeybee%5BTitle%5D)+AND+%22Learn.+Mem%22%5BJournal%5D)">Searching for the memory trace in a mini-brain, the honeybee.</a> Learn. Mem. 8, 53-62 (2001).</li>
<li>Eisenhardt, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Learning+and+memory+formation+in+the+honeybee+%28Apis+mellifera%29+and+its+dependency+on+the+cAMP-protein+kinase+A+pathway%5BTitle%5D)+AND+%22Animal+Biology%22%5BJournal%5D)">Learning and memory formation in the honeybee (Apis mellifera) and its dependency on the cAMP-protein kinase A pathway.</a> Animal Biology. 56, 259-278 (2006).</li>
<li>Hourcade, B., Muenz, T. S., Sandoz, J. C., Rossler, W., Devaud, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-term+memory+leads+to+synaptic+reorganization+in+the+mushroom+bodies%3A+a+memory+trace+in+the+insect+brain%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Long-term memory leads to synaptic reorganization in the mushroom bodies: a memory trace in the insect brain.</a> J. Neurosci. 30, 6461-6465 (2010).</li>
<li>Denker, M., Finke, R., Schaupp, F., Grun, S., Menzel, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neural+correlates+of+odor+learning+in+the+honeybee+antennal+lobe%5BTitle%5D)+AND+%22Eur.+J.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Neural correlates of odor learning in the honeybee antennal lobe.</a> Eur. J. Neurosci. 31, 119-133 (2010).</li>
<li>Szyszka, P., Galkin, A., Menzel, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Associative+and+non-associative+plasticity+in+kenyon+cells+of+the+honeybee+mushroom+body%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Syst.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Associative and non-associative plasticity in kenyon cells of the honeybee mushroom body.</a> Front Syst. Neurosci. 2, 3-3 (2008).</li>
<li>Okada, R., Rybak, J., Manz, G., Menzel, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Learning-related+plasticity+in+PE1+and+other+mushroom+body-extrinsic+neurons+in+the+honeybee+brain%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Learning-related plasticity in PE1 and other mushroom body-extrinsic neurons in the honeybee brain.</a> J. Neurosci. 27, 11736-11747 (2007).</li>
<li>Muller, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prolonged+activation+of+cAMP-dependent+protein+kinase+during+conditioning+induces+long-term+memory+in+honeybees%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Prolonged activation of cAMP-dependent protein kinase during conditioning induces long-term memory in honeybees.</a> Neuron. 27, 159-168 (2000).</li>
<li>Locatelli, F., Bundrock, G., Muller, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Focal+and+temporal+release+of+glutamate+in+the+mushroom+bodies+improves+olfactory+memory+in+Apis+mellifera%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Focal and temporal release of glutamate in the mushroom bodies improves olfactory memory in Apis mellifera.</a> J. Neurosci. 25, 11614-11618 (2005).</li>
<li>Stollhoff, N., Menzel, R., Eisenhardt, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spontaneous+recovery+from+extinction+depends+on+the+reconsolidation+of+the+acquisition+memory+in+an+appetitive+learning+paradigm+in+the+honeybee+%28Apis+mellifera%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Spontaneous recovery from extinction depends on the reconsolidation of the acquisition memory in an appetitive learning paradigm in the honeybee (Apis mellifera.</a> J. Neurosci. 25, 4485-4492 (2005).</li>
<li>Stollhoff, N., Eisenhardt, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Consolidation+of+an+extinction+memory+depends+on+the+unconditioned+stimulus+magnitude+previously+experienced+during+training%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Consolidation of an extinction memory depends on the unconditioned stimulus magnitude previously experienced during training.</a> J. Neurosci. 29, 9644-9650 (2009).</li>
<li>Snodgrass, R. E. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aSnodgrass%2C+RE+%22Anatomy+of+the+honeybee%22">Anatomy of the honeybee</a>. , Comstock Publishing Associates. New York. (1956).</li>
<li>Wustenberg, D., Gerber, B., Menzel, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Short+communication%3A+long-+but+not+medium-term+retention+of+olfactory+memories+in+honeybees+is+impaired+by+actinomycin+D+and+anisomycin%5BTitle%5D)+AND+%22Eur.+J.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Short communication: long- but not medium-term retention of olfactory memories in honeybees is impaired by actinomycin D and anisomycin.</a> Eur. J. Neurosci. 10, 2742-2745 (1998).</li>
<li>Vollbehr, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Zur+Orientierung+junger+Honigbienen+bei+ihrem+1%5BTitle%5D)+AND+%22Orientierungsflug.+Zool.+Jb.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Zur Orientierung junger Honigbienen bei ihrem 1.</a> Orientierungsflug. Zool. Jb. Physiol. 79, 33-69 (1975).</li>
<li>Scheiner, R., Erber, J., Page, R. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tactile+learning+and+the+individual+evaluation+of+the+reward+in+honey+bees+%28Apis+mellifera+L.%29%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Comp+Physiol+%5BA%5D%22%5BJournal%5D)">Tactile learning and the individual evaluation of the reward in honey bees (Apis mellifera L.).</a> J. Comp Physiol [A]. 185, 1-10 (1999).</li>
<li>Sanchez, B. rito, G, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Behavioral+studies+on+tarsal+gustation+in+honeybees%3A+sucrose+responsiveness+and+sucrose-mediated+olfactory+conditioning%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Comp+Physiol+A+Neuroethol.+Sens.+Neural+Behav.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Behavioral studies on tarsal gustation in honeybees: sucrose responsiveness and sucrose-mediated olfactory conditioning.</a> J. Comp Physiol A Neuroethol. Sens. Neural Behav. Physiol. 194, 861-869 (2008).</li>
<li>Menzel, R., Manz, G., Menzel, R., Greggers, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Massed+and+spaced+learning+in+honeybees%3A+the+role+of+CS%2C+US%2C+the+intertrial+interval%2C+and+the+test+interval%5BTitle%5D)+AND+%22Learn.+Mem%22%5BJournal%5D)">Massed and spaced learning in honeybees: the role of CS, US, the intertrial interval, and the test interval.</a> Learn. Mem. , 198-208 (2001).</li>
<li>Friedrich, A., Thomas, U., Muller, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Learning+at+different+satiation+levels+reveals+parallel+functions+for+the+cAMP-protein+kinase+A+cascade+in+formation+of+long-term+memory%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Learning at different satiation levels reveals parallel functions for the cAMP-protein kinase A cascade in formation of long-term memory.</a> J. Neurosci. 24, 4460-4468 (2004).</li>
</ol>

<ol><li> Yakalamak arılar deneyimli besin arayan arılar toplamak için, arılar genç arıların oryantasyon uçuşlar 19 kez kaçınarak, sabah veya öğleden sonra ya yakalanırlar. Yem makineleri ya da polen ve nektar toplamak. Şeker yanıt verme ve kendi öğrenme yeteneklerine 20 göre polen ve nektar yem arasındaki farklar gözlenmiştir. Sadece nektar yem yakalamak için, sukroz solüsyonu ile dolu yapay bir besin kaynağı kovanı ve hayvanların yanına monte edilebilir orada toplanabilir. Kovana dönen Polen yem ve arka bacaklar 20 polen sepetleri ile tespit edilebilir. </li><li> Tespit ve taşıma: deney sonuna kadar öğrenmek ve hayatta kalmak için yeteneğini etkileyebilir, çünkü buz üzerinde arıların Genişletilmiş soğutma kaçınılmalıdır. Tarsi tüp içinde sakkaroz solüsyonu ile yanlışlıkla uyarılması önlemek için dikkatli bir şekilde sabit olması. Arılar succrose çözüm 3,21 ile tarsal uyarılması öğrenmek için gösterilmiştir, çünkü bu önemlidir. </li><li> Olfaktör klima: klima çalışmaların sayısı arası deneme aralığını ve test süresi noktası 3,22 çalışmanın odak bağlı olarak çeşitli olabilir. </li><li> Beslenme: arıların doyma düzeyi, öğrenme performansı ve bellek tutma 3,23 etkilediği bilinmektedir . Bu deneyler planlama dikkate alınmalıdır. </li><li> Enjeksiyon: Hava keselerinde balarısı toraks 17 bulunmaktadır. Solunum sistemi ile ilgili bu hayati parçaları, hayatta kalmak için gerekli. Böylece bakım, enjeksiyon sırasında hava keseciklerinin zarar vermemeye dikkat edilmelidir. Hava kabarcıkları serbest hava keseciklerinin zarar gösterir. </li></ol>

<table><tbody><tr><td>Omnifix şırınga 20 ml</td><td>B. Braun Medical</td><td>4616200 V</td><td></td></tr><tr><td>Beyaz rafine ev şekeri</td><td>Kaisers Supermarket, Berlin, Almanya</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Karanfil yağı</td><td>Bombastus, Freital, Almanya</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Multipette plus</td><td>Eppendorf</td><td>4981 000.019</td><td></td></tr><tr><td>30'lu arı tüpü rafı</td><td>Ev yapımı</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Plastik tüpler</td><td>Ev yapımı</td><td></td><td></td></tr><tr><td>UV ışık geçirgen pleksiglas piramit</td><td>Ev yapımı</td><td></td><td>yükseklik = 30cm, tepe 3.5 x 3.5cm, taban 18x18cm</td></tr><tr><td>Yapışkan bant</td><td>Tesa, Hamburg, Almanya</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Kılcal çubuklar 1-5&amp;mu;l</td><td>Selzer</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Kılcal uçlar 1-5&amp;mu;l</td><td>Selzer</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Filtre kağıdı 0.16-0.2 mm kalınlığında</td><td>Macherey-Nagel</td><td>MN 616 veya MN615</td><td>1.3 cm çapında dairesel parçalar haline getirilmiş</td></tr><tr><td>Tek kullanımlık hipodermik iğne</td><td>B. Braun Medical</td><td>4657683</td><td>0.45 mm çapında</td></tr></tbody></table>

bal arısı burnumun extension tepki klasik koşullanma davranış farmakoloji ( apis mellifera)

Behavioural Pharmacology in Classical Conditioning of the Proboscis Extension Response in Honeybees (Apis mellifera)

Bal arısı (Apis mellifera), iletişim ve yönlendirme becerileri ve etkileyici öğrenme yeteneği 1,2 bilinmektedir. Bir bal arısı kolonisi hayatta gıda kaynaklarının sömürülmesi bağlı olduğundan, toplayıcı arıların öğrenmek ve değişken çiçek sitelerin yanı sıra karlılık ezberlemek. Toplayıcı arılar doğal ortamda kolaylıkla eğitilebilir bir beslenme yerinde yem ve koku veya renk olarak ilgili sinyalleri öğrenmeye. Iştahlı ilişkisel öğrenme klima bireysel harnessed bal arıları 3,4 burnumun uzantısı yanıt (PER) tarafından da laboratuarda kontrollü şartlar altında incelenebilir. Bu öğrenme paradigması, basit ve son derece güvenilir bir şekilde 5-12 öğrenme ve bellek oluşumu altında yatan nöronal ve moleküler mekanizmaların çalışma sağlar. Davranış farmakolojisi yaklaşım moleküler mekanizmaları incelemek için kullanılır. İlaçlar, öğrenme ve bellek oluşumu 13-16 sırasında ya da sonrasında belirli molekülleri fonksiyonu ile müdahale sistemik olarak enjekte edilir . Burada PER klima harnessed bal arıları nasıl eğitmek ve arı uçuş kas içine enjeksiyon yoluyla sistemik ilaçların nasıl uygulanacağını göstermektedir.

Biz sistemik ilaç uygulama tarafından bal arıları iştahlı bir koku alma klima paradigma (Apis mellifera) bir davranış farmakoloji yöntemi nasıl uygulanacağını göstermektedir. Bu yöntem, soruşturma mekanizmalarının altında yatan basit ve güvenilir bir şekilde öğrenme ve bellek oluşumu sağlar.

Bal arısı burnumun Extension Tepki Klasik Koşullanma Davranış Farmakoloji ( Apis mellifera)

Bal arıları (Apis mellifera), iletişim ve yön bulma becerileri ile etkileyici öğrenme yetenekleriyle iyi bilinirler1,2. Çünkü ...

Bu prosedürün genel amacı, öğrenme ve bellek oluşumunun altında yatan moleküler mekanizmaları incelemektir. Bal arılarında ilk adım, serbest uçan arıların kovanlarından toplanmasıdır. Ardından, arılar plastik tüplere sabitlenir.Prosedürün üçüncü adımı, klasik koşullanmanın gerçekleştirilmesidir. Öğrenme ve bellek oluşumu üzerindeki etkilerini incelemek amacıyla, koşullanma çevresindeki belirli zaman noktalarında ilaçlar enjekte edilebilir. Prosedürün son adımı, bellek tutulumunu test etmektir.Nihayetinde, ilaç tedavisinden sonra davranışlarda meydana gelen değişiklikler, bal arılarında öğrenme ve bellek oluşumunun altında yatan moleküler mekanizmaları ortaya çıkarabilir. Bu yöntem, bellek oluşumunun moleküler mekanizmalarını açığa çıkararak, öğrenme ve bellek alanındaki temel soruların yanıtlanmasına yardımcı olabilir.Genel olarak, bu yöntemde yeni olan araştırmacılar, koşullanma ve bellek geri çağırma sırasında uyaranların sunum zamanlamasının kesin olması gerektiği için zorluklar yaşayacaklardır. Ayrıca, besleme rejimi kritiktir. Prosedür, laboratuvarımdaki lisansüstü öğrencilere cutting gearing ve Johannes faberg tarafından gösterilecektir. Deneyden bir gün önce, UV ışığına geçirgen bir pleksiglas piramit kullanarak saat 14:00 ile 16:00 arasında arıları toplayın.Laboratuvara dönüldüğünde, piramidi tabanının üzerine yerleştirin ve tepe kısmı açık kalacak şekilde duvarları bir havluyla karartın. Tepe kısmını açın ve bir cam tüpü açıklığın üzerine tutarak, tekrar kapatmadan önce tek bir arının tüpün içine girmesini sağlayın. Sonbahar ve kış mevsimlerinde tüm arılar bir cam tüpe aktarılana kadar bu prosedüre devam edin.Arılar dışarıda uçmadığında, bir arı kovanı seranın içinde bir ağ içerisinde tutulur ve tekil arılar doğrudan ağdan yakalanır. Her arı için bir cam tüp kullanarak, tüpü iki buçuk ila üç buçuk dakika boyunca buz üzerinde soğutarak arıyı immobilize edin. Arıyı dikkatle gözlemleyin ve hareket etmeyi bıraktığı anda buzdan çıkarın.Hareketsiz hale getirilen arıyı, yapışkan bant kullanarak küçük bir plastik tüpe sabitleyin. Arının başının, toraksının veya bacaklarının hareket edemediğinden, ancak abdomeninin serbestçe hareket edebildiğinden emin olun. Ayrıca boyun bölgesinin sıkıştırılmaması da önemlidir.Bir arı hazırlandığında, daha iyi taşıma ve tanımlama için tüpü bir raf üzerindeki numaralandırılmış bir deliğe yerleştirin.Tüpler her zaman aynı sondaj deliğine geri yerleştirilir. İşlemlerden sonra, arıları kondisyonlama alanından farklı bir konumda, saat 16:00 ile 18:00 arasında besleyin. Arılara ve antenlerine dokunarak Probosis uzanma yanıtını veya PER'i ortaya çıkarın.Bir sakkaroz çözeltisi ile, arının yaklaşık dört mikrolitre SRAs çözeltisinden oluşan bir damlacığı tüketmesini sağlayın. Arının antenlerine, probosisine veya plastik tüpe bulaşmamaya dikkat edin. Her arıyı, artık beslenmeyi bırakana kadar besleyin.Antenleri solüsyona değdiğinde hızlı ve güvenilir bir PER sergilediklerini gösterin. Deneyin sonraki akşamlarında, her arıya bir damla sükroz solüsyonu ile dört kez besleme yapın. Plastik bir kaba yaklaşık 0,5 ila bir santimetre yüksekliğinde musluk suyu doldurun.Sabitlenmiş arıların bulunduğu rafı, lysa plakalarını platform olarak kullanarak kasenin içine yerleştirin. Kaseyi kartonla kapatın ve oda sıcaklığında saklayın. Gece boyunca bekletin. Arılar, toplama işleminden sonraki sabah saat 10:00 civarında kokuya dayalı koşullanmaya tabi tutulur.Deneyin başlamasından 30 dakika önce. Tasma takılmış arıların bulunduğu rafı, koşullandırma alanının yakınına ancak arıların eğitileceği egzoz borusu çıkışının uzağına yerleştirin. Ardından, bir çeker ocak içinde çalışarak koşullandırma uyaranını hazırlayın.Yuvarlak bir filtre kağıdının üzerine filtre uçlu pipet ile dört µL karanfil yağı damlatın. Kokulu filtre kağıdını 20 mL'lik bir şırınganın içine yerleştirin ve pistonu takın. Deney yapana akustik sinyal gönderecek olan ses oynatıcısını ayarlayın.Bu işlem; uyarının zamanlamasının, başlangıç uyarısının, bitiş uyarısının, sürenin ve yerleştirmenin hassas olmasını sağlar. Koşullanma boyunca arının davranışlarını kaydetmek için hazırlık yapın. Arı, koşullu uyaranın başlangıcı ile koşulsuz uyaranın sunumu arasında SSIS'ini uzatırsa pozitif bir puan verilir.Açık mandibulalar arasındaki sanal bir çizgiyi geçmek. Bir edinim denemesine başlamak için, eğitilecek arıyı seçin ve 10 saniye boyunca egzozun önüne yerleştirin. Bu on saniyelik aralığın bitiminden kısa süre önce, koku içeren şırıngayı arının antenlerinden üç santimetre uzağa yerleştirin. Şırınga aracılığıyla 20 mililitre havayı iterek kokuyu beş saniye boyunca sunun.Üç saniye sonra, her iki antenin distal flagella kısmının ventral bölgesine nemli bir kürdan yardımıyla sukroz çözeltisi dokundurularak koşulsuz uyaran verilir. Arıların ve antenlerin üzerine çözelti damlatmamaya dikkat edilerek, arının kürdanı yalamasına izin verilir. Bu bileşik uyaran dört saniye sürer; ardından arılar eğitim ortamından çıkarılır ve tekrar rafa yerleştirilir.Koşullu uyaranın sunumundan 13 saniye sonra, bir eğitim denemesi 28 saniye sürer. 10 dakikalık bir denemeler arası aralıktan sonra arıyı eğitim alanına geri getirin. Üç denemenin ikincisini daha önce gösterildiği şekilde gerçekleştirin ve son eşleştirme işlemini yapmadan önce ek olarak 10 dakika bekleyin.Günlük eğitim tamamlandıktan sonra rafları tekrar kaba yerleştirin. Saat 16:00 ile 18:00 arasında her arıya birer adet 4 µL sakkaroz çözeltisi damlası ile dört kez beslemeyi unutmayın. Daha önce gösterildiği gibi, tutma testleri eğitimden sonra dakikalarla günler arasında herhangi bir aralıkta gerçekleştirilebilir. Arı rafını 30 dakika boyunca koşullandırma alanının yakınına yerleştirerek hafıza testine hazırlanın.Bir arıyı egzozun önüne 10 saniye boyunca yerleştirerek testi başlatın. Koşullu uyarıcıyı beş saniye boyunca sunun ve bir PER oluşup oluşmadığını kaydedin. Günlük testler tamamlandıktan sonra, rafları tekrar kaba yerleştirin.Her bir arının, daha önce gösterildiği gibi saat 16:00 ile 18:00 arasında dört mikrolitre sucrose çözeltisinden oluşan tek bir damla ile dört kez beslendiğini hatırlayın; tüm deneyin sonunda, analizlere dahil edilecek arının antenine SRA çözeltisi dokundurularak probosisini hâlâ uzatabildiği doğrulanmalıdır; arılar deneyin tamamında hayatta kalmalı ve sağlam bir PER'e sahip olmalıdır. Bazı çalışmalarda, farmakolojik müdahalelerin koku hafızası üzerindeki etkisini incelemek için sistemik enjeksiyonlar kullanılır. Bu enjeksiyonlar, deneyin tasarımına bağlı olarak farklı zamanlarda uygulanabilir.Başlamak için, tek kullanımlık bir hipodermik iğne kullanarak, S scootle fissürünün üzerindeki uçuş kasının yakınında, S scootin'in arka kısmındaki kütikülde küçük bir delik açın. Ardından, bir cam kılcal tüpü test edilecek çözeltiden 1 µL ile doldurun. Kılcal tüpü kütiküldeki deliğe yerleştirin ve çözeltiyi uçuş kasına enjekte edin.Eğitimli deneyciler, her 30 saniyede bir B enjekte edebilmekte, bu da enjeksiyon ve koşullanmanın hassas bir şekilde zamanlanmasına olanak sağlamaktadır. Burada iki deney sunulmuştur. İlk deney, eğitimden önce uygulanan sistemik salin enjeksiyonunun bir belleğin öğrenilmesi üzerindeki etkisini incelemektedir.Bu çalışmada üç grup bulunmaktadır; tedavi almayan A grubu, bir mikrolitre sistemik fosfat tamponlu salin enjeksiyonu yapılan grup veya bir şam grubu. Bu tedaviler, burada solda gösterilen eğitimden 30 dakika önce uygulanmıştır. Edinme sırasında koşullu tepki gösteren hayvanların yüzdesi, üç eğitim denemesi boyunca artmış ve gruplar arasında herhangi bir fark gözlenmemiştir.Sağdaki sütun grafikleri, ne PBS enjeksiyonunun ne de yalancı lezyonun hafıza tutulumunu etkilemediğini göstermektedir. İkinci deneydeki eğitimin 24 saat sonrası için, enjeksiyonlar eğitimden 40 dakika sonra yapılmıştır; arılar, salin alan bir grup ve bir mikrolitre protein sentez inhibitörü olan anisomycin alan başka bir grup olarak ikiye ayrılmıştır. Sağdaki sütun grafikleri, anisomycin alan arılarda hafıza tutulumunda belirgin bir düşüş olduğunu göstermektedir. Bu sonuçlar, koku hafızasının oluşumunda protein sentezinin önemini vurgulamaktadır.Bu prosedürün ardından, öğrenme ve bellek oluşumunun gelişimi sonrası nörofizyolojik temeli nedir gibi ek soruları yanıtlamak amacıyla elektrofizyolojik kayıtlar yapılabilir. Bu teknik, öğrenme ve bellek araştırmaları alanındaki araştırmacıların, bal arılarındaki bellek oluşumunun moleküler ve nörofizyolojik mekanizmalarını keşfetmelerinin yolunu açmıştır.

behavioural-pharmacology-classical-conditioning-proboscis-extension

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Sinirbilim

Arılar iştahlı bir koku alma öğrenme paradigması (PER-condition) klimalı olabilir. Uyaranlara gibi kokular kullanarak, aynı anda Kalsiyum Görüntüleme koku uyarılmış mantar vücut nöron aktivitesini ölçmek için kullanılır kaydedilir hangi davranış bir yöntem...

In vivo Ca 2 + - Bal Arısı Koku Öğrenme sırasında Mantar Vücut Nöronlar Görüntüleme

Bu protokolü biz durumu dokunsal uyaranlara karşı bal arıları koşulmuş ve ince çaplı anten örnekleme deseni kinematik analiz için bir 2B hareket yakalama tekniği tanıtmak nasıl gösterir.

Dokunsal İklimlendirme Ve Bal Arısı yılında antennal Örnekleme Stratejileri Hareket Analizi (<em&gt; Apis mellifera</em&gt; L.)

Bal arısı (Apis mellifera) için geliştirilen Proboscis Extension Response (PER) koşullandırma protokolü, birçok böcek türünde birkaç farklı öğrenme mekanizmasını incelemek için ekolojik olarak ilgili ve kolayca ölçülebilir bir araç sağlar.

Bir burnumun Extension Tepki Böcekler Davranış Plastisitesi incelenmesi için protokol: Basic, Biyomedikal Uygulama ve Tarımsal Araştırma

Serbestçe hareket eden bombus arılarının (Bombus terrestris) ağız kısımlarının çözeltideki besin maddelerine ve toksinlere karşı kısa vadeli tat tepkilerini araştırmak için yeni bir davranışsal test tanımlanmıştır.

A Novel Davranış Testi (Bumble Bees Serbestçe hareket eden Bireyin Tat Cevapları, Araştırma<em&gt; Bombus terrestris</em&gt;)

Bu yazının serbest uçan arılar için basit non-invaziv yöntemler yanı sıra ölçülü arıların kesin lokalize tedavi izin daha invaziv varyantları da dahil olmak üzere, bal arıları için farmakolojik ajanların uygulanması için çeşitli protokoller açıklanır.

Ölçülü ve Serbest uçan Bal Arısı Nörofarmakolojik Manipülasyon,<em&gt; Apis mellifera</em

Bu iletişim kuralı--dan geleneksel bilgisayarları kullanan geleneksel web kamera video böcek anten ve hortum pozisyonların kare kare takibi için yeni yazılım, SwarmSight, kullanma adımları açıklar. Ücretsiz, açık kaynak yazılım çerçeveler yaklaşık 120 kez insanlar daha hızlı işler ve insan doğruluğu daha iyi at gerçekleştirir.

SwarmSight: Gerçek zamanlı izleme böcek anten hareketleri ve hortum uzantısı refleks bir ortak hazırlık ve geleneksel donanım kullanarak

Biz araştırmacılar görsel öğrenme ve hafıza oluşumu analizi serbestçe bireyler taşınmasıyla mümkün değil bir düzeyde çalışmaya izin verir klasik koşullanma harnessed karıncalar için bir iletişim kuralı mevcut.

Ahşap karıncalar görsel klasik koşullanma

Silikon sondalar anestezi sıçan kullanarak nöronal aktivitenin Ekstrasellüler kayıtları açıklanacaktır. Bu teknik, aynı anda 100 den fazla nöron birden çok beyin bölgelerinin daha fazla bilgi almak sağlar. Bu tek hücre çözünürlük ile, birden fazla yerel devrelerin nöronal toplulukları dinamikleri hakkında bilgi sağlar.

Anestezi Rat Silikon Probları Büyük ölçekli Nöronal Toplulukları Kaydı

Sıçanlarda işitsel protez araştırma için klasik bir korku klima davranışsal paradigmanın uygulaması açıklanmıştır. Bu paradigma, her iki algılama belirlenmesi için mekanizması, ve bir sonuç ölçütü olarak kalp hızı kullanılarak farklı akustik ve elektrik uyaranlar arasında ayrımcılık sağlar.

Bir Klasik Koşullanma ve Kalp hızı Yaklaşımı ile İşitsel Akustik ve Elektrik uyarıcı Stimulus Çifti Ayrımcılığın Davranış Belirlenmesi

Zorla yüzmeye testi kemirgenlerde potansiyel antidepresan etkinliğini değerlendirmek için deneysel bir yaklaşım olarak onaylanmıştır. Deneysel hayvan, su ve kaçış ilgili hareketlilik davranış bir tank yerleştirilir rakamlarla gösterir. Bu testin fare sürümü için ortak prosedürler açıklanmıştır.

Fare Zorla Swim Testi

Öğrenin, klasik koşullanma ve ilaç uygulamaları kullanarak Apis mellifera'da öğrenme ve bellek oluşumunun moleküler mekanizmalarını incelemeyi. Bu yöntem davranışsal farmakoloji araştırmaları için güvenilir bir model sunar.

Bal arısı burnumun Extension Tepki Klasik Koşullanma Davranış Farmakoloji ( Apis mellifera)

Daha fazla video keşfet