JoVE Encyclopedia of Experiments
Sinirbilim
0 görüntüleme • 1:21 dk • May 30th, 2025
Nöronal aksonlar ve dendritler sergileyen fare kortikal beyin dokusunun sabit bir bölümünü alın. Dendritler, aksonlarla sinapslar oluşturan dendritik dikenler olarak bilinen çıkıntılara sahiptir.
Dokuyu lipitlere bağlanan osmiyum-ferrosiyanür ile inkübe edin, ardından görüntüleme için yapısal kontrastı artıran başka bir osmiyum uygulaması yapın.
Makromoleküllere bağlanan ve kontrastı artıran ağır bir metal bileşiği ile boyayın.
Reçine gömmek için artan alkol konsantrasyonları kullanarak dehidrat.
Dokuyu reçineye gömün, bir tutucuya monte edin ve görüntüleme kalitesini optimize etmek için altınla kaplayın.
Üç boyutlu görüntüleme için odaklanmış iyon ışını taramalı elektron mikroskobu kullanın.
Reçineye gömülü ince bir doku tabakasını çıkarmak için bir iyon ışını kullanın ve bir görüntüleme yüzeyini açığa çıkarın.
Açıkta kalan yüzeye bir elektron demetini odaklayın ve bir görüntü oluşturmak için geri saçılan elektronları tespit edin.
Seri dilimleme ve görüntüleme gerçekleştirin ve sinaptik olarak bağlı bir kortikal nöronal ağı ortaya çıkaran üç boyutlu bir görüntüyü yeniden oluşturun.