Name: Bakteriyofaj Görüntüleme Kütüphane Peptitler Mezenkimal Hücreler Gen ekspresyonunu modüle ve Unicortical Kemik Hastalıkları Osteogenezi potansiyalize (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2010-12-10T17:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 53 s
Description: Keşfedin bakteriyofaj görüntüleme kütüphanesi ile kemik hedefleyen peptitleri izole etme yöntemini. Mezenkimal hücre farklılaşmasını ve kemik onarımını potansiyalize eden bu teknik, osteopeni ve osteoporoz gibi kemik kaybı hastalıkları için yeni tedavi stratejileri sunar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Sağlık, AR53579, Osteogenezi National Institutes: Kemik Tropic Peptitler potansiyelize Ulusal Sağlık Enstitüleri, AR056422 osteojenik Peptitler Anabolik Etkisi Ulusal Sağlık Enstitüleri, T32 AR050960, Kas-iskelet Doku Onarımı ve Rejenerasyon DOD, PC051219 Nucleolin: Prostat Kanseri ve Kemik İliği Endotel Hücre Adezyon Romanı Arabulucu Savunma Bakanlığı, PC061508 Prostat Kanseri Metastaz Hücre Kemik İliği yapışma Arabulucular

<ol><li>Diduch, D. R., Coe, M. R., Joyner, C., Owen, M. E., Balian, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Two+cell+lines+from+bone+marrow+that+differ+in+terms+of+collagen+synthesis%2C+osteogenic+characteristics%2C+and+matrix+mineralization%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Bone+Joint+Surg.+Am%22%5BJournal%5D)">Two cell lines from bone marrow that differ in terms of collagen synthesis, osteogenic characteristics, and matrix mineralization.</a> J. Bone Joint Surg. Am. 75, 92-105 (1993).</li>
<li>Stoddart, M. J., Furlong, P. I., Simpson, A. E., Davies, C. M., Richards, R. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Viability+in+ex+vivo+cultured+cancellous%5BTitle%5D)+AND+%22Eur.+Cells.+Mater%22%5BJournal%5D)">Viability in ex vivo cultured cancellous.</a> Eur. Cells. Mater. 13, 69-70 (2007).</li>
<li>Lehr, J. E., Pienta, K. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preferential+adhesion+of+prostate+cancer+cells+to+a+human+bone+marrow+endothelial+cell+line%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Natl.+Cancer+Inst%22%5BJournal%5D)">Preferential adhesion of prostate cancer cells to a human bone marrow endothelial cell line.</a> J. Natl. Cancer Inst. 90, 118-123 (1998).</li>
<li>Schuster, N., Götz, C., Faust, M., Schneider, E., Prowald, A., Jungbluth, A., Montenarh, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Wild-type+p53+inhibits+protein+kinase+CK2+activity%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Cell+Biochem%22%5BJournal%5D)">Wild-type p53 inhibits protein kinase CK2 activity.</a> J. Cell Biochem. 81, 172-183 (2001).</li>
<li>Cwirla, S. E., Peters, E. A., Barrett, R. W., Dower, W. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Peptides+on+phage%3A+a+vast+library+of+peptides+for+identifying+ligands%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Natl.+Acad.+Sci.+U.+S.+A%22%5BJournal%5D)">Peptides on phage: a vast library of peptides for identifying ligands.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 87, 6378-6382 (1990).</li>
<li>Doorbar, J., Winter, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation+of+a+peptide+antagonist+to+the+thrombin+receptor+using+phage+display%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Mol.+Biol%22%5BJournal%5D)">Isolation of a peptide antagonist to the thrombin receptor using phage display.</a> J. Mol. Biol. 244, 361-369 (1994).</li>
<li>Ellerby, H. M., Arap, W., Ellerby, L. M., Kain, R., Andrusiak, R., Rio, G. D., Krajewski, S., Lombardo, C. R., Rao, R., Ruoslahti, E., Bredesen, D. E., Pasqualini, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anti-cancer+activity+of+targeted+pro-apoptotic+peptides%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Med%22%5BJournal%5D)">Anti-cancer activity of targeted pro-apoptotic peptides.</a> Nat. Med. 5, 1032-1038 (1999).</li>
<li>Goodson, R. J., Doyle, M. V., Kaufman, S. E., Rosenberg, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-affinity+urokinase+receptor+antagonists+identified+with+bacteriophage+peptide+display%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Natl.+Acad.+Sci.+U.+S.+A%22%5BJournal%5D)">High-affinity urokinase receptor antagonists identified with bacteriophage peptide display.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 91, 7129-7133 (1994).</li>
<li>Pasqualini, R., Koivunen, E., Ruoslahti, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+peptide+isolated+from+phage+display+libraries+is+a+structural+and+functional+mimic+of+an+RGD-binding+site+on+integrins%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">A peptide isolated from phage display libraries is a structural and functional mimic of an RGD-binding site on integrins.</a> J. Cell Biol. 130, 1189-1196 (1995).</li>
<li>Pasqualini, R., Koivunen, E., Ruoslahti, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Alpha+v+integrins+as+receptors+for+tumor+targeting+by+circulating+ligands%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Alpha v integrins as receptors for tumor targeting by circulating ligands.</a> Nat. Biotechnol. 15, 542-546 (1997).</li>
<li>Pasqualini, R., Koivunen, E., Kain, R., Lahdenranta, J., Sakamoto, M., Stryhn, A., Ashmun, R. A., Shapiro, L. H., Arap, W., Ruoslahti, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aminopeptidase+N+is+a+receptor+for+tumor-homing+peptides+and+a+target+for+inhibiting+angiogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">Aminopeptidase N is a receptor for tumor-homing peptides and a target for inhibiting angiogenesis.</a> Cancer Res. 60, 722-727 (2000).</li>
<li>Rajotte, D., Arap, W., Hagedorn, M., Koivunen, E., Pasqualini, R., Ruoslahti, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+heterogeneity+of+the+vascular+endothelium+revealed+by+in+vivo+phage+display%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Clin.+Invest%22%5BJournal%5D)">Molecular heterogeneity of the vascular endothelium revealed by in vivo phage display.</a> J. Clin. Invest. 102, 430-437 (1998).</li>
<li>Rajotte, D., Ruoslahti, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Membrane+dipeptidase+is+the+receptor+for+a+lung-targeting+peptide+identified+by+in+vivo+phage+display%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Biol.+Chem%22%5BJournal%5D)">Membrane dipeptidase is the receptor for a lung-targeting peptide identified by in vivo phage display.</a> J. Biol. Chem. 274, 11593-11598 (1999).</li>
<li>Wang, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation+of+high-affinity+peptide+antagonists+of+14-3-3+proteins+by+phage+display%5BTitle%5D)+AND+%22Biochemistry%22%5BJournal%5D)">Isolation of high-affinity peptide antagonists of 14-3-3 proteins by phage display.</a> Biochemistry. 38, 12499-12504 (1999).</li>
<li>Sugahara, K. N., Teesalu, T., Karmali, P. P., Kotamraju, V. R., Agemy, L., Greenwald, D. R., Ruoslahti, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Coadministration+of+a+tumor-penetrating+peptide+enhances+the+efficacy+of+cancer+drugs%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Coadministration of a tumor-penetrating peptide enhances the efficacy of cancer drugs.</a> Science. 328, 1031-1035 (2010).</li>
<li>Sikes, R. A., Cooper, C. R., Beck, G. L., Pruitt, F., Brown, M. L., Balian, G. Bone Stromal Cells as Therapeutics Targets in Osseous Metastasis. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aSikes%2C+RA+%22Cancer+Growth+and+Progression.+%22Integration%2FInteraction+of+Oncologic+Growth%22%22">Cancer Growth and Progression. "Integration/Interaction of Oncologic Growth"</a>. Meadows, G., Kluwer, K. H. , Academic Publishers. Boston, MA. 369-386 (2005).</li>
<li>Santos, J. L., Pandita, D., Rodrigues, J., Pêgo, A. P., Granja, P. L., Tomás, H., Balian, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Receptor-Mediated+Gene+Delivery+in+Mesenchymal+Stem+Cells+using+PAMAM+Dendrimers+conjugated+with+Osteotropic+Peptides%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Pharmaceutics%22%5BJournal%5D)">Receptor-Mediated Gene Delivery in Mesenchymal Stem Cells using PAMAM Dendrimers conjugated with Osteotropic Peptides.</a> Molecular Pharmaceutics. , Forthcoming (2010).</li>
</ol>

Bu video üretim, Inc, New England Biolabs Bu makalede kullanılan bazı reaktiflerin üreten sponsor oldu.

<table><tbody><tr><td>Faj Ekranlama Peptit Kütüphanesi Kiti-Ph.D-12</td><td>New England Biolabs</td><td>E8110S</td><td></td></tr></tbody></table>

bakteriyofaj görüntüleme kütüphane peptitler mezenkimal hücreler gen ekspresyonunu modüle ve unicortical kemik hastalıkları osteogenezi potansiyalize

Peptides from Phage Display Library Modulate Gene Expression in Mesenchymal Cells and Potentiate Osteogenesis in Unicortical Bone Defects

İki yeni sentetik peptidlerin kemik oluşumunu hızlandıran ve kollajen matriks kullanılarak teslim edilebilir. Bu çalışmanın amacı, bir unicortical defekt modeli, kemik onarım üzerindeki etkilerini araştırmaktır. Tedavi mezenkimal hücreler, alkalin fosfataz aktivitesinde bir artış, üretilen bu hücreler tarafından nodül oluşumu gösterdi ve Runx2, Osterix, kemik sialoprotein, ve osteokalsin için genlerin ifade arttı. Kontrolü daha az etkili iken kollajen sünger, kemik defektleri peptid terfi onarım ile ıslatılır. Bu çalışmada elde edilen sonuçlar, in vitro peptit ile tedavi edilen mezenkimal hücreler, kollajen sünger kullanarak in vivo teslim peptidler unicortical kusurlar tamir teşvik, osteogenesis doğru farklılaştırmak, ve gösterdi.

Bir faj gösterim kütüphanesi hedef kemiği de peptit dizileri tanımlamak için kullanılır oldu. Amacı, mezenkimal hücre farklılaşması, bu peptitler etkisini araştırmak ve kemik rejenerasyonu üzerindeki etkisini belirlemek için.

Bakteriyofaj Görüntüleme Kütüphane Peptitler Mezenkimal Hücreler Gen ekspresyonunu modüle ve Unicortical Kemik Hastalıkları Osteogenezi potansiyalize

İki yeni sentetik peptid kemik oluşumunu hızlandırmakta olup bir kolajen matris kullanılarak uygulanabilmektedir. Bu çalışmanın amacı, ... etkilerini incelemekti.

Bu deneyin genel amacı, mezenkimal hücre farklılaşmasını potansiyalize eden ve kemik onarımını teşvik eden dizileri belirlemektir. İlk adım, biyop tarama (biop panning) yöntemiyle kemiğe bağlanan faji izole etmektir. Ardından, mezenkimal hücrelere bağlanan peptit dizileri belirlenmeli ve buna bağlı olarak gen ekspresyonunda meydana gelen sonraki değişiklikler saptanmalıdır.Peptit dizilerinin rejeneratif amaçlarla kemiğe nasıl iletilebileceğini belirlemek için deneyler gerçekleştirin. Son bir adım olarak, kemik onarımını histolojik olarak inceleyin; sonuçlar birlikte değerlendirildiğinde, in vitro hücre farklılaşması ve in vivo kemik onarımı mekanizmaları hakkında önemli bilgiler sunabilir. Bir fago teşhir kütüphanesi ile biopanning tekniği kullanmanın avantajları, kemiği hedefleyen ve mezenkimal hücrelerin farklılaşmasını stimüle etmek ve kemik onarımını potansiyelize etmek için kullanılabilecek peptitleri tanımlayabilmiş olmamızdır.Nihayetinde, bu peptid dizileri kemik onarımına yönelik terapötik modalitelerde ve osteopeni ile osteoporoz gibi kemik kaybı durumlarının tedavisinde faydalı olabilir. ULA ve Pascal'ın biop panning yönteminin kan damarlarını hedefleyen peptid dizilerini izole etmek için kullanılabileceğini gösterdiği bir çalışmaya dayanarak, biz de bu yöntemi kemikteki mekanizmaları sorgulamak için uyarlamayı tercih ettik. In vivo biop panning prosedürü için, 10¹⁰ plak oluşturan birimindeki N-E-B-P-H-D 12 faji sergileme peptid kütüphanesi, 10 haftalık bir valve C faresinin kalbi aracılığıyla perfüze edildi.Yaklaşık beş dakika sonra fareyi ötanize edin, femur kemiklerini açığa çıkarıp disseke edin, uçlarını kesin ve kemik iliğini uzaklaştırın. Sol femuru hem içten hem dıştan 10 kez PBS ile durulayın. Ardından kemiği ER 2 5 3 7 bakterilerinin bulunduğu ortama ekleyin.Bağlanmamış fajları uzaklaştırmak için, 21 gauge iğneli bir şırınga ile %2'lik kurutulmuş yağsız süt kullanarak sağ femur ara kanalını 10 kez durulayın. Ardından, bağlanmış fajları bir molar tris ile nötralize edilmiş pH 2.2 hidroklorik asit glisin tamponu ile ara kanaldan elüye edin.Fajı çoğaltmak için, ER 2 5 3 7 bakterilerine EIT ekleyin ve 4,5 saat boyunca kültüre edin. Süpernatanları dikkatlice yeni tüplere aktarın ve polietilen glikol sodyum klorür çözeltisi ekleyerek fajı üç kez çöktürün; tüpleri dört santigrat derecede gece boyunca inkübe edin.Son olarak, peleti %0,02 sodyum azid içeren TBS içerisinde yeniden süspande edin. Amplifiye edilen EIT'lerin plak oluşturan birimlerini belirlemek için fajları plakalara ekin. İn vivo biyopanning prosedürünü hem elüye edilen hem de elüye edilmeyen fajlar için dört kez tekrarlayın.Havuzlanmış fajları bakteri kültürlerinde çoğaltın. Faj display kiti ile birlikte sağlanan 98 primerini kullanarak, nihai faj DNA'sı olan DNA dizisini saflaştırın ve miktarını belirleyin. Önemli bir nokta olarak, faj DNA dizisi temsilinin frekansını hesaplayın.Şimdi glisin glisin glisin serin lizin sekansı içeren peptitleri sentezleyin ve laboratuvarımızda geliştirilen klonlanmış bir fare multipotansiyel kemik iliği stromal hücre hattı olan D1 hücrelerini %90 konfluense kadar çoğaltın. Hücreleri tripsinizle ayırın, pelletlemek için santrifüjleyin ve peptit boyaması için sayın; hücreleri jelatin kaplı chamber slide lamlara ekip 24 saat boyunca kültüre edin.Hücreleri PBS ile yıkayın ve 30 dakika boyunca %4 paraldehit ile sabitleyin. Ardından glisinle başlayarak, ardından BSA Aden ve BBSA biotin bloklama çözeltileri ile bloklama inkübasyonlarını gerçekleştirin.100 µM biyotinize L seven ve R one peptitleri ekleyin. Hücreleri PBS ile beşer dakikalık üç yıkama işleminden geçirin. 1/1000 dilüsyonunda LOR strippin ekleyin, üzerini folyo ile kapatın ve karanlık bir çekmecede 30 dakika inkübe edin.Hücreleri yıkayın ve lamelleri vector shield montaj medyumu ile kapatın. Şimdi, cerrahi işlemden 24 saat önce lamları floresan mikroskobu altında analiz edin. Jel sünger silindirlerini ıslatın.20 µM L7 veya R1 peptid içeren veya peptid içermeyen PBS tamponlu jel köpük silindirleri steril 12 kuyucuklu kültür kaplarına aktarın ve cerrahi işlem saatine kadar gece boyunca 4 °C'de soğutun. Jel köpük kompozitini kullanana kadar buz üzerinde bekletin.Salin irrigasyonu altında pnömatik bir frez kullanarak, üç milimetre genişliğinde ve sekiz milimetre uzunluğunda, geniş, oblong, unikortikal bir defekt oluşturun. Hazırlanan jel köpükleri, tüm implant edilen iskeleleri hafifçe vurarak yerleştirerek kemik defektine uygulayın. Sıçanları ötanize edin ve belirlenen zaman noktalarında tibyaları toplayın; kemik defektini dikkatlice kontrol edin ve hasat edilen tibyaları parafin kesitleme için %10 nötr tamponlu formalinde sabitleyin.Son olarak, kemik matriksini işaretlemek için tüm doku kesitlerini hematoksilin-eosin ile boyayın. Fluorescein isothiocyanate ile işaretlenmiş Aden, in vitro büyütülen hücrelerdeki peptid bağlanmasının mikroskobik olarak tespit edilmesine olanak tanır. Burada, peptidlerin hücreler üzerindeki osteojenik etkisini belirlemek için peptidler kültürdeki mezenkimal hücrelere bağlanır.Kültürdeki in vitro mezenkimal hücreler, hücre morfolojisindeki değişiklikleri belirlemek için test peptitleri ile işlenebilir. Örneğin, dördüncü günde hücreler agrege olmaya başlar ve agregatlar zamanla büyüyerek nodülleri oluşturur. İlginç bir şekilde, h ve e ile boyanmış kemik kesiti UV ışığı altında otofloresans gösterir.Kemik ve kemik dışı dokular arasındaki bu daha yüksek kontrast, gelfoam artı peptid ile tedavi edilen defektlerdeki kemik onarımını belirlemek için kesitlerdeki kemik varlığını nicelendiren analizleri kolaylaştırır. Yalnızca gelfoam ile karşılaştırıldığında, burada artı peptid ile doldurulan defektler zamanla en yüksek miktarda kortikal onarım göstermiştir. Bu prosedürü uygularken, nihai peptid grubunu seçene kadar zamanla kaçınılmaz olarak birikecek olan çok sayıda örnek nedeniyle veri girişinde son derece metodik olmak önemlidir.Kemik hedefli peptidleri tanımlamak için bir teknik olarak in vivo biop panning geliştirilmesi, artık kemik onarımı ve kemik kaybı tedavisi için kullanılabilecek potansiyel ilaçlara sahip olduğumuz anlamına gelmektedir. Kemik onarımının temelini oluşturan mekanizmalardan biri, aynı zamanda kemik kaybında da rol oynamaktadır. Bu mekanizmaların daha ayrıntılı olarak anlaşılması ve gecikmiş kırıklar ile osteoporoz gibi bozuklukların tedavisi için kullanılabilecek araçların geliştirilmesi, sağlık hizmetleri için tasarlanabilecek tedavilerin iyileştirilmesine yardımcı olacaktır.

peptides-from-phage-display-library-modulate-gene-expression

Research

JoVE Journal

Biology

Biyoloji

Öncü hücrelerin osteoklastlara farklılaşması sitokinler ve büyüme faktörleri tarafından düzenlenir. Burada, osteoklastların in vivo olarak farklılaşması için yeni bir gen transfer tekniği ve sitokinlerin osteoklastogenez üzerindeki etkilerini incelemek için bir yöntem olarak öncü hücrelerin in vitro osteoklastlara farklılaşması için hücre kültürü protokolleri açıklanmaktadır.

Bir Roman In vivo Gen Transferi Tekniği ve In vitro Hücre Tabanlı Tahliller

Burada, damar oluşumu içinde vivo görselleştirmek için bir iletişim kuralı mevcut ve gerçek zamanlı olarak 3D İskele tarafından multiphoton mikroskobu. Genetiği değiştirilmiş iskele anjiogenez bir fare grefti kritik Kemik defekti modelinde incelenmiştir. Daha fazla yeni kan damarları tedavi grubunda denetimlerde tespit edildi.

Angiogenez Multiphoton mikroskobu In Vivo genetiği değiştirilmiş 3D-PLGA/nHAp İskele tarafından grefti kritik Kemik defekti tamir için görselleştirme

Kemik morfogenetik Protein 2 (BMP2) katkılı Biyomalzeme yeni bir tedavi stratejisi sendikasız Kemik kırıkları iyileşmek için kullanılmaktadır. Yan etkileri faktörü kontrol edilemez bir sürümden kaynaklanan üstesinden gelmek için biz site için yeni bir strateji teklif-doğrudan böylece malzemeleri ile geliştirilmiş Osteojenik yetenekleri oluşturma faktörü, hareketsiz.

Site yönettiği immobilizasyon kemik morfogenetik protein 2 katı yüzeyler için tıklayın kimya tarafından

Biz mRNA ifade biyolojik kapaklarini türetilmiş hücre (PDC) vitamin C (C vitamini) ve 1,25-dihidroksi vitamin D [1,25-(OH)2D3] tarafından indüklenen araştırmak için bir protokol mevcut. Buna ek olarak, PDC osteocytes, kondrosit ve adiposit ayırt etmek yeteneği değerlendirmek.

Yalıtım insan alveoler kapaklarini ve Osteojenik etkinlik kapaklarini türetilmiş hücre D vitamini etkileri Mezenkimal kök hücrelerin

Biz iki kemiğin insan hücre hatları ile yayımlanan veziküller mineraller durumunu karşılaştırmak için bir iletişim kuralı mevcut: hFOB 1.19 ve SAO'lar-2. Qafqaz profillerini Alizarin Red-boyama, ultraviyole (UV) ışık görselleştirme, transmisyon elektron mikroskobu (TEM) görüntüleme ve enerji dağıtıcı x-ışını microanalysis (EDX) tarafından S (AR-S) analiz edildi.

Mineraller hFOB 1.19 tarafından üretilen ve SAO'lar-2 hücreleri kullanarak transmisyon elektron mikroskobu ile enerji dağıtıcı x-ışını Microanalysis Analizi

Burada, faj görüntüleme peptid kütüphanesi kullanarak FGFR2'ye bağlanan küçük peptidlerin taranması için ayrıntılı bir protokol sayılmiyoruz. Seçilen peptidlerin FGFR2 in vitro'ya olan yakınlığını ve hücre çoğalmasını bastırma yeteneğini daha da analiz ediyoruz.

Faj Görüntüleme Peptid Kütüphanesi Kullanılarak Fibroblast Büyüme Faktörü Reseptörü 2'yi Hedefleyen Küçük Peptidlerin Taranması ve Tanımlanması

Bu protokol, fare embriyosu taze dondurulmuş bölümlerinden kıkırdak ve kemik izolasyonu için lazer yakalama mikrodizeksiyon açıklar. Kıkırdak ve kemik hızla cresyl menekşe boyama ile görselleştirilmiş ve transkripsiyonanalizi için yüksek kaliteli RNA verim hassas toplanabilir.

Gen Ekspresyonu Analizi için Fare Embriyonik Kıkırdağı ve Kemiğinin Lazer Yakalama Mikrodizmesi

Bu protokol, in vivo osteoklast aktivitesini kontrol eden kritik genleri anlamak için kurallı bir yöntemi açıklar. Bu yöntem, iskelet fenotipini analiz etmek için transgenik bir fare modeli ve bazı kurallı teknikler kullanır.

Koşullu Stat3 Silme Fare Modelinin İskelet Fenotip Analizi

Her yerde, disrrengülasyonu çok sayıda insan hastalığına karışmış kritik bir protein post-translational modifikasyondur. Bu protokol, faj ekranının, her yerde bulunmanın özgüllüğünü, verimliliğini ve kalıplarını kontrol eden E3 ligaslarının aktivitesini bağlayabilen ve modüle edebilen yeni ubiquitin varyantlarını izole etmek için nasıl kullanılabileceğini açıklar.

E3 Ligases için Ubiquitin Varyant Modülatörleri Geliştirmek için Faj Ekran Kullanma

Protokol, disseke edilmiş fare embriyo yüz süreçlerinden veya kültürlenmiş fare embriyonik palatal mezenkim hücrelerinden tüm hücre protein lizatlarını izole etmek ve fosforile protein seviyelerini değerlendirmek için müteakip batı lekelemesini gerçekleştirmek için bir yöntem sunar.

Fosfoprotein Analizi için Fare Yüz İşlemleri ve Kültürlenmiş Palatal Mezenkim Hücrelerinden Tüm Hücre Protein Lisatlarının İzolasyonu

Keşfedin bakteriyofaj görüntüleme kütüphanesi ile kemik hedefleyen peptitleri izole etme yöntemini. Mezenkimal hücre farklılaşmasını ve kemik onarımını potansiyalize eden bu teknik, osteopeni ve osteoporoz gibi kemik kaybı hastalıkları için yeni tedavi stratejileri sunar.

Bakteriyofaj Görüntüleme Kütüphane Peptitler Mezenkimal Hücreler Gen ekspresyonunu modüle ve Unicortical Kemik Hastalıkları Osteogenezi potansiyalize (Video) | JoVE Journal

Bakteriyofaj Görüntüleme Kütüphane Peptitler Mezenkimal Hücreler Gen ekspresyonunu modüle ve Unicortical Kemik Hastalıkları Osteogenezi potansiyalize

Daha fazla video keşfet