JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 1:24 dk. • August 7th, 2025
Biyobaskılı iskelet kası yapılarını ele alalım.
Bu yapılar, gömülü kas lifleri ve mikro küreler içeren fibrin hidrojel sütunları içerir.
Mikroküre, nörotrofik faktörleri çevreleyen gözenekli bir polimer yapıdır.
Civciv embriyolarından izole edilen dorsal kök gangliyonlarını alın.
Her yapıya bir ganglion yerleştirin ve kuluçkaya yatırın.
Nörotrofik faktörler, kontrollü bir fizyolojik konsantrasyonda mikrokürelerden salınır ve nörit adı verilen nöronlardan çıkıntıların filizlenmesini kolaylaştırır.
Yapıları düzeltmek için bir sabitleyici ekleyin.
Bir tamponla yıkayın ve spesifik olmayan antikor bağlanmasını önlemek için bir bloke edici çözelti ekleyin.
Spesifik olarak nörite bağlanan birincil antikorlarla inkübe edin.
Bağlanmamış antikorları çıkarmak için tampon ile durulayın.
Primer antikorlara bağlanan floresan etiketli ikincil antikorlar ekleyin.
Fazla antikorları çıkarmak için tampon ile yıkayın.
Yapıyı, nükleer boya ve lamel içeren montaj ortamı kullanarak monte edin.
Konfokal bir mikroskop altında, nörit büyümesini görselleştirin.