Omurilik Yaralanmasını İncelemek için Yenidoğan Sıçanında Kortikospinal Nöronlara Hedeflenen Viral İletim

Cerrahi olarak maruz kalan bir servikal omurilik ile anestezi uygulanmış bir yenidoğan sıçanı ile başlayın.

Bu sıçana, bir tasarımcı reseptörü ve bir floresan proteini kodlayan bir anterograd virüs enjekte edildi: virüs, beynin somatomotor korteksindeki kortikospinal sistem (CST) nöronlarını hedef alıyor.

Omurilik arterini kullanarak omuriliğin orta hattını tanımlayın.

CST akson terminallerinin bulunduğu hedeflenen spinal laminanın arkasına, bir rekombinaz enzimini kodlayan retrograd bir virüs içeren bir cam iğne yerleştirin.

İğneyi omuriliğe indirin ve virüsü enjekte edin.

Virüsün yayılmasına izin verin, ardından iğneyi yavaşça çekin ve kesiği dikin.

Virüs, CST akson terminaline girer ve geriye doğru hücre gövdesine gider ve burada rekombinaz enzimini eksprese eder.

Bu enzim, anterograd virüs tarafından iletilen transgeni aktive eder ve tasarımcı reseptörün ve floresan proteinin sadece iki kez enfekte nöronlarda ekspresyonuna izin verir. Bu yöntem, omurilik yaralanmasında CST nöronlarının hedefli analizine izin verir.

Omuriliğe doğrudan enjeksiyonlar için, omurilik arterini tanımlayarak omuriliğin orta hattını yaklaşık olarak belirlemek için cam enjeksiyon iğnesinin ucunu kullanın.

Ardında