JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 2:24 dk. • August 29th, 2025
Başı eğik olarak stereotaksik bir çerçeve üzerinde anestezi uygulanmış bir fare ile başlayın.
Farede bir kafa derisi kesisi, beyincik ile beyin sapı arasındaki bir beyin omurilik sıvısı veya BOS dolu boşluk olan cisterna magna'yı kaplayan dura mater'i ortaya çıkarır.
Forseps kullanarak durayı kavrayın ve cisterna magna'ya erişmek için içinde küçük bir açıklık oluşturun.
Fazla BOS'u çıkarmak için steril bir bez kullanın.
Omuriliğin beyin sapına bağlandığı anatomik referans noktasını belirleyin, ardından stereotaksik koordinatları belirleyin.
Terapötik solüsyonu içeren mikropipeti tutan stereotaksik kolu indirin.
Mikropipeti cisterna magna'dan önceden belirlenmiş koordinatlarda beyin sapına ilerletin.
Solüsyonu yavaşça enjekte edin ve geri akışı önlemek için pipeti kısa bir süre tutun.
Terapötik çözelti doğrudan beyin sapı ve üst omurilik bölgelerine ulaşır ki bunlar standart stereotaksik yöntemlerle ulaşılması zordur.
Beyin sapının sırt yüzeyini, açık duradan ayrıntılı yer işaretleriyle görüntüleyin.
Oksipital kemikten atlasa uzanan durayı tutmak için açılı forsepsleri kullanın, ardından durada yaklaşık 0,5 ila 1,5 milimetrelik küçük bir açıklık yapmak için yaylı makası kullanın. Dura açıldıktan sonra, fazla beyin omurilik sıvısını steril bir Q-ucu ile boşaltın. Merkezi kanalın dördüncü ventriküle açıldığı nokta olan obeks, standart ön-arka ve mediolateral sıfır noktasıdır.
Stereotaksik kolu kullanarak pipeti veya şırıngayı hedefe yerleştirin. Sırt kolunu, dorsoventral sıfır noktasından oluşan sırt yüzeyine indirin. Ardından pipeti beyin sapına indirin ve solüsyonu enjekte edin.
3 ila 50 nanolitre arasındaki hacimleri kullanırken iğne izini önlemek için enjeksiyondan sonra iğneyi bir ila beş dakika yerinde bırakın. Ardından stereotaksik kolu kullanarak pipeti veya şırıngayı kaldırın ve bunu birden fazla hedef için tekrarlayın.