Yumurtlamayı Engellemek için Uyanık Bir Dişi Farenin Beynine Tetrodotoksin Mikroenjeksiyonu

Damıtılmış su ile doldurulmuş mikroşırıngaları alın ve bunları mikroenjektörlere bağlı borulara bağlayın.

Mikroenjektör uçlarında bir su damlası görünene kadar mikroenjektör pistonlarına bastırın, ardından borularda bir hava cebi oluşturmak için pistonları hafifçe geri çekin.

Toksin etkisiz hale getirici bir madde ve üzerlerine parafin filmleri ile ıslatılmış pedleri yerleştirin.

Tetrodotoksin'i parafilm üzerine pipetleyin ve mikroenjektörlere aspire edin.

Mikroşırıngaları mikroenjeksiyon pompasına monte edin ve mikroenjektör uçlarında bir damla görünene kadar pistonları ilerletin. Damlaları atın.

Hipotalamusuna implante edilmiş kılavuz kanülleri olan uyanık bir dişi sıçan tutun.

Mikroenjektörleri kılavuz kanüllere yerleştirin.

Mikroenjeksiyonu gerçekleştirin.

Tetrodotoksin, hipotalamik nöronlardaki sodyum kanallarını bloke ederek nöronal ateşlemeyi önler.

Bu inhibisyon, gonadotropin salgılayan hormon salgılayan nöronları baskılayarak yumurtlamayı engeller.

Geri akışı önlemek için mikro enjektörleri yerinde bırakın. Ardından bunları çıkarın ve kılavuz kanüllerin kapaklarını yerine takın.

Mikroenjeksiyon pompasını infüzyon hızı ve toplam enjeksiyon süresi ile yapılandırın. Daha sonra 2 adet 10