Kök Hücre Kaynaklı Nöronal Progenitörlerin İnsan Kortikal Dilimlerine Nakli
JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 2:58 dk. • August 29th, 2025
Kortikal nöronlara farklılaşma için hazırlanmış kök hücre türevli nöronal progenitör hücrelerin yapışık bir kültürüyle başlayın.
Ortamı çıkarın, ardından hücre dışı matrisi bozmak ve hücreleri ayırmak için bir enzim ekleyin.
Enzimi nötralize etmek için bir inhibitör kullanın, ardından taze bir ortam ekleyin.
Süspansiyonu bir tüpe, santrifüje aktarın ve hücreleri izole etmek için süpernatanı atın.
Beyin dokusuna nakli kolaylaştırmak için hücreleri bir bazal membran matrisinde yeniden süspanse edin, ardından bunları soğuk bir kılcal tüpe yükleyin.
Bir ortam içeren bir transwell düzeneğine bir insan kortikal dilimi alın.
Ortamın bir kısmını çıkarın, ardından hücre süspansiyonunun damlacıklarını dokuya enjekte edin.
Matrisin katılaşmasına izin vermek için inkübe edin.
Dokuyu daldırmak için bir ortam ekleyin, ardından progenitör hücrelerin nöronlara farklılaşmasını, nöritlerini uzatmasını ve konakçı kortikal nöronlarla sinapslar oluşturmasını sağlamak için inkübe edin.
Kortikal dilim artık analiz için hazırdır.
Ortamı hücre kültürü şişesinden çıkarın. Farklılaşmanın yedinci gününde, 500 mikrolitre tripsin ekleyerek kortikal olarak astarlanmış GFP-lt-NES hücrelerini ayırın ve oda sıcaklığında 5 il
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin