JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 2:30 dk. • August 29th, 2025
Açıkta kalan bir siyatik siniri olan bir ısıtma yastığına yerleştirilen anestezi uygulanmış bir yenidoğan sıçanı ile başlayın.
Sinirin distal bölgesini kaldırın ve bir boya ile karıştırılmış bir plazmit DNA çözeltisi enjekte edin. Boya, plazmit dağıtımının izlenmesine yardımcı olur.
Elektrot kolları arasında küçük bir boşluk bırakarak sinirin etrafına cımbız tipi bir elektrot yerleştirin.
Akım iletimi için bu boşluğa tuzlu su ekleyin.
Schwann hücrelerinde geçici zar gözenekleri oluşturan sinir liflerini çevreleyen bir elektrik darbesi uygulayın. Ardından, elektrot konumlarını ters çevirin ve ikinci bir elektrik darbesi uygulayın. Bu, gözeneklerden plazmit DNA girişini arttırır.
Elektroporasyondan sonra, hücre zarı plazmidi yeniden kapatır ve hapseder.
Bölgeyi temizleyin, cilt kesisini kapatın, dezenfekte edin ve farenin iyileşmesine izin verin.
Daha sonra, plazmit DNA çekirdeğe yer değiştirir ve Schwann hücre DNA'sına entegre olarak başarılı gen transferini sağlar.
Açıkta kalan siniri kaldırmak için bir iğne kullanarak sinirin distal tarafını nazikçe çekin. Cam mikro pipeti sinirin distal bölgesine yerleştirin ve sinir yeşil görünene kadar hafif pozitif basınç uygulayarak DNA solüsyonunu e
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin