JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 1:44 dk. • August 29th, 2025
Temel büyüme ortamında sıçan feokromasitoma 12 veya PC12 hücreleri ile başlayın.
Farklılaşma ortamı içeren kollajen kaplı bir kuyu alın ve hücreleri içine yerleştirin.
Hücre yapışmasını kolaylaştırmak için inkübe edin.
Parçalanabilir nanoyapılı gözenekli silikon veya PSi filmi alın.
Filmin gözenekleri, negatif yüklü NGF ile pozitif yüklü PSi yüzeyi arasındaki elektrostatik etkileşimler yoluyla adsorbe edilen sinir büyüme faktörü veya NGF ile yüklenir.
NGF yüklü PSi filmini kuyunun içine yerleştirin ve inkübe edin.
Medyayı düzenli aralıklarla değiştirin.
PSi filmi içindeki NGF, difüzyon yoluyla ve silikon iskele bozulduğunda ortama salınır.
Bu dağıtım sistemi, NGF'nin uzun bir süre boyunca kontrollü bir oranda sürekli olarak salınmasını sağlar.
NGF'ler PC12 hücresi ile etkileşime girerek hayatta kalmasını sağlar ve nörit büyümesini ve dallanmasını kolaylaştırır.
Tohum bir kez santimetre kare başına 10 ila dördüncü hücreler çalışma alanı üzerinde bir colligen tipi bir kaplamalı plaka varlığında farklılaştırma ortamı. Plakaları inkübatöre yerleştirin.
37 santigrat derecede 24 saat sonra, her bir plakaya taze murin, beta, NGF veya NGF yüklü gözenekli silikon taşıyıcı ekleyin ve plakaları inkübatöre geri koyun.