Işık kaynaklı işitsel stimülasyon için fare dorsal koklear çekirdeğine virüs aracılı gen transferi

Kafatası açıkta olacak şekilde anestezi uygulanmış bir fare ile başlayın.

Kafatası, interparietal kemik üzerinde, orta hattın solunda ve lambdoid sütürün kaudalinde bir kraniyotomi içerir ve beyinciği ortaya çıkarmak için dura çıkarılır.

İşitsel sinyalleri işleyen nöronları içeren bir beyin sapı yapısı olan altta yatan dorsal koklear çekirdeği veya DCN'yi ortaya çıkarmak için lateral sol serebellumu aspire edin.

Kan pıhtılaşmasını önlemek ve kalan sıvıyı temizlemek için tuzlu su ekleyin.

Işığa duyarlı bir iyon kanalı olan opsin kodlayan bir viral vektör içeren bir mikroşırınga yerleştirin.

İğneyi DCN'ye indirin.

Viral süspansiyonu kontrollü bir oranda enjekte edin, ardından iğneyi geri çekin.

Kesiği dikin ve farenin iyileşmesine izin verin.

Enjekte edilen virüs, DCN nöronal reseptörlerine bağlanır ve endositoza uğrar.

Nöronal çekirdeğin içinde, viral DNA gen ekspresyonunu tetikleyerek opsin üretimine yol açar.

Model, işitsel yolun ışık kaynaklı uyarımı için hazırdır.

DCN'nin üzerinde bulunan sol serebellumun lateral en kısmını aspire etmek için beş Fransız emme borusu kullanın. Aspirasyona yardımcı olmak için, görselleştirmeyi iyileştirmek ve keskin bir görüntü sağlamak için mikroskobun odak