Cisterna Magna Enjeksiyonu ile Bir Fare Modelinde Hedefe Yönelik İlaç Verilmesi

Bir floresan işaretleyici geni ifade eden ve stereotaktik bir çerçeveye sabitlenmiş anestezi uygulanmış bir fare ile başlayın.

Cisterna magna'ya, beyin omurilik sıvısına veya beyincik ile beyin sapı arasındaki BOS dolu boşluğa daha kolay erişim için baş aşağı doğru eğilir.

Göz merhemi sürün, boynunuzu tıraş edin ve sterilize edin.

Cisterna magna'yı kaplayan zarı ortaya çıkarmak için orta hat kesisi yapın.

Cisterna magna'ya erişmek için dokuları bir ayırıcı ile geri çekin.

Bir indükleyici ilaçla doldurulmuş ve bükülmüş bir iğne ile donatılmış bir mikroşırınga alın.

İğneyi yerleştirin ve cisterna magna'ya ulaşmak için zarı delin.

BOS içinde homojen dağılım için ilacı yavaşça enjekte edin.

İlaç beyin yüzey hücrelerine girer ve işaretleyici genin ekspresyonunu tetikleyerek kırmızı floresan proteinleri üretir.

BOS akışı, ilacın daha derin beyin bölgelerine yayılmasını önler.

Floresan görüntüleme, yüzey hücrelerinin seçici olarak etiketlenmesini doğrular ve BOS'a maruz kalan bölgelere hedefli bir ilaç dağıtımını gösterir.

Hayvanı izofluran odasında uyuşturun.

Ardından, fare kafası tutucusunu, ağızlık ameliyat masasının yüzeyinden yaklaşık 30 derecelik bir açıda olacak şekilde ayarlayın ve hayvanın kafasını tutucuya sabitleyin. Cisterna magna'ya erişilebilirliği artırmak için, hayvanın vücudunu, baş aşağı doğru eğik olacak şekilde masanın yüzeyinden yaklaşık 30 derece uzakta konumlandırın, bu da vücudun geri kalanıyla 120 derecelik bir açı oluşturacak ve cisterna magna'ya erişimi kolaylaştırmak için boynun arkasını uzatacaktır. Hayvan düzgün bir şekilde yerleştirildikten sonra, oftalmik merhem sürün, boynunun arkasını tıraş edin ve bölgeyi alkollü mendiller ve Betadine ile dezenfekte edin.

Oksipital kemik seviyesinden başlayıp arkaya doğru uzanan orta hat kesisi yapmak için cerrahi makas kullanın. Yüzeysel bağ dokusunu ve boyun kaslarını, cisterna magna'nın üzerindeki dural zarı ortaya çıkaracak şekilde ince uçlu cımbızla orta hattan yanlara doğru çekerek nazikçe ayırın. Prosedür boyunca cisterna magna'nın görselleştirilmesini sağlamak için küçük bir cerrahi ayırıcı yerleştirin.

Oksipital kemiğin kaudal ucunu tanımlayın ve daha önce bükülmüş iğneyi hemen altına yerleştirin. Dura delindikten sonra, şırıngayı nazikçe yukarı doğru ve hayvanın vücuduna paralel olarak çekerek iğnenin bükülmüş ucunun yüzeyin altına nüfuz etmesine izin verin, bu da daha iyi stabilite sağlayacaktır. Beyin omurilik sıvısının doğal akışına müdahale etmemek için bileşiği yavaşça enjekte edin.

Enjeksiyondan sonra iğneyi bir dakika içeride dinlendirin, ardından ince uçlu forseps yardımıyla dikkatlice çıkarın.