JoVE Encyclopedia of Experiments
Sinirbilim
0 görüntüleme • 2:59 dk • August 29th, 2025
Anestezi uygulanmış bir inme sonrası fareyi stereotaksik bir çerçeveye sabitleyin.
Kafa derisi kesisini tekrar açın ve açıkta kalan kafatasını tuzlu suyla ıslatılmış pamukla temizleyin.
Beyin dokusundaki beyaz-sarı nekrotik çekirdeği ve inme bölgesini doğrulayan bir çapak deliğini tanımlayın.
Bu nekrotik çekirdek, hasarlı nöronlar ve işlevsel olmayan damar sistemi içerir.
Pompaya mikro gözenekli hidrojel parçacık yüklü bir şırınga takın ve enjeksiyon koordinatlarını ayarlayın.
Şırıngayı çapak deliğinin üzerine indirin, ardından strok bölgesine yerleştirin.
Beyin dokusuna zarar vermeden kademeli difüzyonu sağlamak için hidrojeli kontrollü bir akış hızında enjekte edin.
Hidrojelin çapraz bağlanmasına izin vermek için inkübe edin ve bir biyomateryal iskelesi oluşturun.
Şırıngayı yavaşça geri çekin ve sızıntı olmadan hidrojel tutulmasını sağlayın.
Kesi işlemini cerrahi yapıştırıcı ile kapatın ve fareyi kafesine geri koyun.
Hidrojel iskelesi, hücre dışı matrisi taklit ederek hücresel infiltrasyonu ve yeni kan damarı oluşumunu indükleyerek hidrojelin nöroterapötiklerdeki potansiyelini gösterir.
Beynin üzerindeki kesiği tekrar açın ve kafatasındaki kalıntıları temizlemek için tuzlu suya batırılmış pamuk kullanın.
Beyaz, sarı bir doku çemberi ve matkaptan çıkan çapak deliği görünecektir. Enjeksiyon pompasını farenin üzerinde 90 derece açıyla kilitleyin.
Şırıngayı pompaya yükleyin ve şırıngayı çapak deliğinin üzerine yönlendirmek için pompayı ve X ve Y yönlerini hareket ettirin. İğne deliğin üst kısmına değene kadar pompayı Z yönünde hareket ettirin.
Ve dijital ekran konsolundaki Z'yi sıfırlayın. Şırıngayı Z yönünde 0,75 milimetre hareket ettirin ve dakikada bir mikrolitre akış hızında dört ila altı mikrolitre hidrojel enjekte etmek için pompa konsolunda başlat düğmesine basın. Hidro jelin tamamı teslim edildiğinde, jelin çapraz bağlanmaya başlamasına izin vermek için beş dakikalık bir zamanlayıcı ayarlayın.
Beş dakika sonra, şırıngayı yavaşça yukarı çekmek için Z düğmesini çevirin. İğne kafatasından yeterince uzakta olduğunda, pompanın kilidini açın ve çıkarın. Daha sonra cildi kafatasının üzerine kapatın ve fareyi anesteziden iyileşene kadar izlemeli temiz bir kafese yerleştirin.