JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Mikrobiyoloji
0 görüntülenme • 3:22 dk. • January 30th, 2026
IgM ile opsonize edilmiş koyun kırmızı kan hücrelerini (SRBC) ve hücre yüzeyi antijenlerine bağlı IgM antikorları alın.
C5 hariç komplement proteinleri içeren serum ekleyin.
C1 kompleksi antikorlara bağlanır ve aktif hale gelir.
Aktive C1, C4 ve C2'yi parçalar, C3 dönüştürücü oluşturur; bu dönüşümaz C3'ü parçalayıp C3b'yi SRBC'lere biriktirir.
C5 olmadan C3b C3bi'ye ayrılır.
SRBC'leri makrofaj kültürüne ekleyin.
C3bi, makrofaj reseptörüne bağlanır ve SRBC fagositozunu tetikler.
Lizlere hipotonik bir çözelti ekleyin ve içselleştirilmemiş SRBC'leri çıkarın.
Hücreleri lizlemek ve SRBC hemoglobini salgılamak için liz tamponu ekleyin.
Bir algılama reaktifini tanıtın.
Ürea varlığında, hemoglobin diaminoflorenin hidrojen peroksit tarafından oksidlenmesini katalize eder ve renkli bir ürün üretir.
Renkli ürünün emilimini ölçün, bu da fagositozlu SRBC'lerle orantılıdır.
Bu test, antikor etiketli bakterilerin fagositozunu opsonize SRBC'ler kullanarak bakteriyel hedefleri taklit eder.
Opsonizasyon testi için, oda sıcaklığında 30 dakika boyunca 50 mikrolitre tavşan anti-SRBC immünoglobulin M veya IgM ile 2 kat 10 ile sekizde bir koyun kırmızı kan hücresi veya SRBC inkübe yapın.
Daha sonra opsonize SRBC'leri,
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin