İnsan Akciğer dokusunda Bakteriyel Lokalizasyon ve Konak Etkileşiminin Görüntülemesi

Flüoresans etiketli bir Staphylococcus aureus süspansiyonu ve aynı floresan etiketli bakteriyle enfekte olmuş insan alveolar akciğer dokusu alın.

Lifli konfokal floresan mikroskopi probun distal ucunu bakteriyel süspansiyona sokup tarama yapın.

Parlak floresan sinyaller, bakteriyel zar etiketlemesini ve başarılı prob aktivasyonunu doğrular

Prob süspansiyondan geçerken floresansı kaydedin.

Hidrojen peroksitle ıslatılmış bir lens temizleyici doku kullanarak, probu silinerek kalıntı bakterileri temizleyin ve arka plan floresansını önleyin

Temizlenmiş probu dokuya doğrudan temas ettirin ve yüzeyi taralayın.

Dokuda, kolajen ve elastin lifleri otofloresan bir matriks olarak görünürken, floresan etiketli bakteriler belirgin parlak noktalar olarak görülür.

Alveolar boşluklar, floresansı olmayan ve koyu bölgeler olarak görünür.

Hem dokuya yapışmış hem de gevşek ilişkili bakterileri yakalamak için bir video kaydedin; böylece konak alveolar akciğer dokusunda bakteriyel enfeksiyonun gerçek zamanlı görselleştirilmesini mümkün kılarsınız.

Veri toplamaya başlamak için ekranda başlat tuşuna tıklayın veya sol ayak pedalına basarak lazeri açın. Sonra, her bir bakteri süspansiyon örneğini görsün. FCFM görüntüleme lifinin distal ucunu yerleştirin ve lifi süspansiyon boyunca yavaşça hareket ettirerek örneği sorgulayın.

Sağ ayak pedalına basarak veya fiber sample'ın etrafında yavaşça hareket ederken ekrandaki kayıt kontrollerini seçerek istediğiniz uzunlukta video kaydedebilirsiniz. FCFM görüntüleme lifinin distal ucunu %8 hidrojen peroksit ile temizleyin ve örnekler arasında lens temizleme dokuları kullanın. Her bir akciğer dokusu örneğini görüntülemek için, FCFM görüntüleme lifinin distal ucunu numuneye yerleştirerek lifin ucu ile doku arasında doğrudan temas sağlanmasını sağlar.

Sonra görüntüleme lifinin ucunu nazikçe hareket ettirerek örneği sorgulayın. Lifin ucunu dokudan uzaklaştırmak, dokuyu odak düzleminden uzaklaştırır. Ancak, bu yöntem dokuya yapışmayan etiketli bakterileri görüntülemek için kullanılabilir.

Sağ ayak pedalına basarak veya fiber sample'ın etrafında yavaşça hareket ederken ekrandaki kayıt kontrollerini seçerek istediğiniz uzunlukta video kaydedebilirsiniz.