JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Mikrobiyoloji
0 görüntülenme • 2:02 dk. • February 2nd, 2026
Anestezi altında patojenik bir bakteriyle enfekte olan deri kesileri olan bir fareyi alın.
Bakteri, otonom biyolüminesans sağlayan luxABCDE raporlayıcı sistemini içeren bir plazmid taşıyacak şekilde genetik olarak tasarlanmıştır.
Fareyi biyolüminesans görüntüleme platformunda yatağa yerleştirin.
Enfeksiyon noktasında, bakterinin luxA ve luxB genleri lusiferaz enzimini kodlarken, luxCDE genleri uzun zincirli yağlı aldehitleri sentezleyen enzimleri kodlar; bu enzimler lusiferaz için bir substrat görevi görür.
Oksijen varlığında, lusiferaz kofaktörü olan indirgenmiş flavin mononükleotidinin oksidasyonunu katalize eder; bu da uzun zincirli yağlı aldehit ile reaksiyona girerek mavi-yeşil ışık üretir.
Bu biyolüminesans, enfeksiyon bölgesinde metabolik olarak aktif bakterilerin varlığını gösterir.
Görüntüleme sistemi kullanılarak enfeksiyon bölgesini görüntüleyin ve biyolüminesans sinyal yoğunluğunu nicelikle ölçün.
Enfekte yaraların in vivo görüntülemesi için, farelerin görüntüleme cihazına taşınması için biyogüvenlik seviyesi ikinci tutma protokollerini takip edin ve anestezi altındaki fareyi görüntüleme odasında yatağa yerleştirin.
Görüntüleme yazılımında, deneye uygun şekilde pozlama süresi,
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin