Bitki RNA Susturmasını Bastıran Patojen Efektörlerinin Taraması için Ortak İnfiltrasyon Testi

0 görüntüleme2:12 dk • January 30th, 2026

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Her biri GFP kodlayan plazmid taşıyan, diğeri ise efektör protein kodlayan iki Agrobacterium tumefaciens süspansiyonunun eşit hacimli karışımını alın.

Bir delik açın ve iğnesiz bir şırınga kullanarak karışımı sağlıklı, tamamen genişlemiş Nicotiana benthamiana 16c yapraklarının alt yüzeyine sızdırın.

Fazla süspansiyonu yumuşak doku ile kapatarak bakteri aşırı büyümesini önleyin.

Sızan alanları işaretleyin ve bitkileri optimal büyüme koşullarında kuluçkaya geçirin.

Agrobakteriyel , plazmid DNA'larını bitki hücrelerine aktarır; burada GFP ve efektör genler mRNA'lara transkribe edilip proteinlere çevrilir.

Tesisin savunma sistemi, dupleks siRNA'ların RISC'ye yüklendiği RNA susturmasını kullanır. Yolcu ipliği çıkarılır ve kılavuz ipliği kompleksi hedef GFP mRNA'yı bozmaya yönlendirir.

Ancak, efektör proteinler siRNA'lara bağlanır, bu da RISC ile ilişkilerini engeller ve GFP floresansının devam etmesini sağlar.

Bu, bitki RNA'sının susturulmasını bastıran patojenlerin tespitini sağlar.

35S yeşil floresan protein içeren bir Agrobakteriyel kültürün, 35S salatalık mozaik virüsü baskılayıcı 2b, varsayılan efektör veya boş vektör içeren Agrobakteriyel kültürü ile eşit hacimlerde karıştırın. 1 mililitrelik iğnesiz bir şırınga kullanarak, Nicotiana bethamiana 16c yapraklarının abaksiyal taraflarındaki karışık Agrobakteriyel süspansiyonları dikkatlice ve yavaş bir şekilde sızdırın.

Yapraklardan kalan bakteriyelleri yumuşak doku mendil ile çıkarın ve infiltrasyon yapılan yamaların kenarlarını işaret kalemiyle çevreleyin.

11:16

Bitki / Mikrop Moleküler Etkileşimlerinin ve Sinyalizasyonunun Eşzamanlı ve Sistematik Analizi için Hidroponik Birlikte Yetiştirme Sistemi

İlgili videolar

0 Görüntüler

08:10

Patojen için davranışsal savunma eğitimi için görsel bir kılavuz içinde yaprak kesme karıncalar saldırıları

İlgili videolar

0 Görüntüler

05:03

Pseudomonas syringae pv'ye Stoma Yanıtlarının Doğrudan Gözlemi ve Otomatik Ölçümü. domates DC3000 içinde Arabidopsis thaliana

İlgili videolar

0 Görüntüler

06:34

Virüs indüklenen gen susturma (VIGS) Nicotiana benthamiana Ve Domates

İlgili videolar

0 Görüntüler

08:45

Patojen İlişkili Moleküler Desen (PAMP) Triggered Tesisleri Bağışıklık (PTI) için Testi

İlgili videolar

0 Görüntüler

10:58

Nicel ve Otomatik Yüksek throughput Genom çapında RNAi Ekranlar C. elegans

İlgili videolar

0 Görüntüler

07:33

Patates ve Nicotiana benthamiana'da Agroinfiltrasyon ve PVX Agroinfection

İlgili videolar

0 Görüntüler

08:17

Genler belirlenmesi için VIGS-aracılığı ile İleri Genetik Tarama konakçı olmayan Direnç ilgilendim

İlgili videolar

0 Görüntüler

11:50

Kullanarak Bitki Savunma Yanıtları ince Karakterizasyonu için Bakteriyel Yaprak Sızma Deneyi Arabidopsis thaliana-Pseudomonas syringae Pathosystem

İlgili videolar

0 Görüntüler

09:44

Yerfıstığı aflatoksin RNAi aracılı Kontrol: Yöntem Yerfıstığı Mikotoksin Üretim ve Transgen Anlatım Analiz / Aspergillus Pathosystem

İlgili videolar

0 Görüntüler

Son güncelleme: 15 Ağustos 2026