Name: Gastrointestinal Motilite Monitör (Gimm) (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2010-12-01T17:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 15 s
Description: Öğrenin, Gastrointestinal Motilite Monitör ile guinea pig distal kolonunda propulsif motiliteyi nicel olarak değerlendirme yöntemini. Bu teknik, farmakolojik bileşiklerin etkilerini incelemek için kullanılabilir.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

1. Gimm Colon Doku hazırlanması <ol><li> Gastrointestinal Motilite Monitör (Gimm), ilk etapta izole kolon (121 mM NaCl, 5.9 mM KCl, 2.5 mM CaCl 2, 1.2 mM MgCl 2, 25 mM NaHCO 3 buz Krebs çözümü için distal kolon segmenti hazırlamak için 1.2 mM NaH 2 PO 4 ve 8 mM glukoz,% 95 O 2 /% 5 CO 2 ile gazlı). Kalan mezenter dış duvardan uzak temizleyin ve organ banyosuna yerleştirilir zaman ayırt edilir, böylece oral sonunda küçük bir kesi yapmak. Not: doku 2 saat önce deney için buzlu Krebs çözüm kalabilirler. </li><li> Sonra, görüntü elde etme girişimi önlemek için kamera alanının dışında organ banyosuna giriş ve çıkış kanallar yerleştirin. Sürekli prewarmed organ banyosu serpmek (37 ° C) 10 ml / dk akış hızında Krebs çözeltisi oksijenli (% 95,% 5 CO 2). </li><li> Anal vs oral biter takip etmek, orta segmentte 1 cm kadar serbestçe hareket ettiğinden, küçük bir gevşeklik derecesi sağlayan organ banyosunda iki ucundaki pin distal kolon segment (en az 5 cm) . Fekal pelet yerleştirme kolaylığı için araştırmacı doğru sözlü sonuna yerleştirilmelidir. Segment uzunluğu ve gerginlik boylamasına streç ile transit (Dickson ve ark oranını azaltarak, itici motilite oranı etkiler çünkü Kolon bölümleri belirli bir deney seti içindeki her deney için aynı araştırmacı tarafından aynı şekilde tutturulmuş olmalıdır. , 2007). </li><li> Hazırlanması, en az 30 dakika boyunca gelmesini sağlayınız. </li></ol> 2. Gimm ve Veri Toplama ayarlama <ol><li> Gimm sisteminde, perfüzyon odasında kolonik segment altından aydınlatılır. Bir bilgisayar ile arabirim bir dijital video kamera odasının üstünde bir konuma sahiptir. Işık aydınlatma kaynağı ve Gimm yazılım hem de açık olduğundan emin olun. </li><li> Gimm yazılım uygulaması yeni bir deneme kurduktan sonra, epoksi kaplı bir fekal pelet peristaltizm başlatmak için kolon segmentinin oral ucunu takarak ilk deneme başlayacak. Kamerayı açmak ve Kayda başlamak için kayıt düğmesine tıklayın bilgisayardaki kamera düğme üzerine tıklayın. Pelet anal yönde hareketi, video kamera tarafından kaydedilen ve dijital filmlerinizi daha sonra analiz için bir PC üzerinde saklanır. Pelet kolon segmentinin sonuna ulaştığında, kaydı durdurmak için kayıt düğmesini tıklatın. </li><li> Sevk oranı için bir kontrol değeri elde etmek için, sağlıklı bir hayvanın bir kolon segmenti ve ilaç uygulamadan başlar. Her çalışma arasında 5 dakikalık bir iyileşme süresi, tek bir hazırlık 3-5 deneyler. </li><li> Kolonik motilite belirli koşullar veya ilaçların etkilerini belirlemek için, her deneysel durum için 3-5 denemeler / hazırlık yaparlar. Buna ek olarak, en az beş farklı hayvanların en az beş farklı iki nokta üst üste her bir deney gerçekleştirir. </li><li> Dijital film analizi, fekal pelet sevk oranı kolonik segment X cm çapraz bir pelet için gereken süre olarak hesaplanır. </li></ol> 3. Uzaysal Haritalar İnşaatı <ol><li> Tek tek Gimm çalışır elde edilen dijital video, özel Gimm yazılımı kullanılarak Spatiotemporal haritalar dönüştürülebilir. </li><li> Yatay eksen, kolon çapı değişiklikleri videonun her karesini bir siluet kolon görüntü dönüştürme ve hesaplanması ve gri-skala içine boydan boya çapı dönüştürme zamanla çizilir. Sonuçta daralma alanlarda beyaz görünmesini pelet ve dinlenme alanları, siyah görünür. </li><li> Kolon segment üzerinden pelet tarafından katedilen mesafe dikey ekseni temsil edilmektedir. </li></ol> 4. Temsilci Spatiotemporal Haritalar <ol><li> Çeşitli deneysel koşullar altında kolon segmentlerinde pelet motilite gösteren temsili Spatiotemporal haritalar burada gösterilir. X (yatay) eksen pelet kolon segment üzerinden ilerlediğini mesafe temsil ederken, y (dikey) eksen, zamanla pelet konumu temsil eder. <img src="/files/ftp_upload/2435/2435fig1.jpg" alt="Şekil 1" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Şekil 1"> </li><li> Uzaysal harita bir kontrol kolon (normal, işlenmemiş), pelet ~ 2 mm / sn hızında doğrusal ilerleme olacaktır. Buna karşılık, bazı ilaçlar ya da kolonda enflamasyon idaresi durduruldu motilite ve tıkalı motilite gibi kesintiye motilite desenler neden olabilir. </li><li> Y ekseni fekal pelet ve x-ekseni saniye cinsinden zamanı temsil tarafından katedilen mesafe milimetre olarak temsil eden, Gimm gelen sonuçları da grafik olarak gösterilen olabilir. Örneğin, DAMGO (D-ALA 2, N-Me-Phe4, Gly-ol5) yönetimi, biropiat μ-reseptör agonisti, kolon itici hareketliliğinde azalmaya neden olur. </li></ol>

<ol><li>Bayliss, W. M., Starling, E. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+movements+and+innervation+of+the+small+intestine%5BTitle%5D)+AND+%22J+of+Physiol+%28Lond%29%22%5BJournal%5D)">The movements and innervation of the small intestine.</a> J of Physiol (Lond). 24, 99-143 Forthcoming.</li>
<li>Dickson, E. J., Spencer, N. J., Hennig, G. W., Bayguinov, P. O., Ren, J., Heredia, D. J., Smith, T. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+enteric+occult+reflex+underlies+accommodation+and+slow+transit+in+the+distal+large+bowel%5BTitle%5D)+AND+%22Gastroenterology%22%5BJournal%5D)">An enteric occult reflex underlies accommodation and slow transit in the distal large bowel.</a> Gastroenterology. 132, 1912-1924 (2007).</li>
<li>Foxx-Orenstein, A. E., Jin, J. G., Grider, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((5-HT4+receptor+agonists+and+delta-opioid+receptor+antagonists+act+synergistically+to+stimulate+colonic+propulsion%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol%22%5BJournal%5D)">5-HT4 receptor agonists and delta-opioid receptor antagonists act synergistically to stimulate colonic propulsion.</a> Am J Physiol. 275, 979-983 (1998).</li>
<li>Grider, J. R., Foxx-Orenstein, A. E., Jin, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((5-Hydroxytryptamine4+receptor+agonists+initiate+the+peristaltic+reflex+in+human%2C+rat%2C+and+guinea+pig+intestine%5BTitle%5D)+AND+%22Gastroenterology%22%5BJournal%5D)">5-Hydroxytryptamine4 receptor agonists initiate the peristaltic reflex in human, rat, and guinea pig intestine.</a> Gastroenterology. 115, 370-380 (1998).</li>
<li>Kadowaki, M., Wade, P. R., Gershon, <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Participation+of+5-HT3%2C+5-HT4%2C+and+nicotinic+receptors+in+the+peristaltic+reflex+of+guinea+pig+distal+colon%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol%22%5BJournal%5D)">Participation of 5-HT3, 5-HT4, and nicotinic receptors in the peristaltic reflex of guinea pig distal colon.</a> Am J Physiol. 271, 849-857 (1996).</li>
<li>Krauter, E. M., Strong, D. S., Brooks, E. M., Linden, D. R., Sharkey, K. A., Mawe, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Changes+in+colonic+motility+and+the+electrophysiological+properties+of+myenteric+neurons+persist+following+recovery+from+trinitrobenzene+sulfonic+acid+colitis+in+the+guinea+pig%5BTitle%5D)+AND+%22Neurogastroenterol+Motil%22%5BJournal%5D)">Changes in colonic motility and the electrophysiological properties of myenteric neurons persist following recovery from trinitrobenzene sulfonic acid colitis in the guinea pig.</a> Neurogastroenterol Motil. 19, 990-1000 (2007).</li>
<li>Langley, J. N. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aLangley%2C+JN+%22The+Autonomic+Nervous+System%22">The Autonomic Nervous System</a>. , Heffer. Cambridge, UK. (1921).</li>
<li>Linden, D. R., Sharkey, K. A., Mawe, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enhanced+excitability+of+myenteric+AH+neurones+in+the+inflamed+guinea-pig+distal+colon%5BTitle%5D)+AND+%22J+Physiol%22%5BJournal%5D)">Enhanced excitability of myenteric AH neurones in the inflamed guinea-pig distal colon.</a> J Physiol. 547, 589-601 (2003).</li>
<li>Linden, D. R., Sharkey, K. A., Ho, W., Mawe, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cyclooxygenase-2+contributes+to+dysmotility+and+enhanced+excitability+of+myenteric+AH+neurones+in+the+inflamed+guinea+pig+distal+colon%5BTitle%5D)+AND+%22J+Physiol%22%5BJournal%5D)">Cyclooxygenase-2 contributes to dysmotility and enhanced excitability of myenteric AH neurones in the inflamed guinea pig distal colon.</a> J Physiol. 557, 191-205 (2004).</li>
<li>Linden, D. R., Chen, J. X., Gershon, M. D., Sharkey, K. A., Mawe, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Serotonin+availability+is+increased+in+mucosa+of+guinea+pigs+with+TNBS-induced+colitis%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Gastrointest+Liver+Physiol%22%5BJournal%5D)">Serotonin availability is increased in mucosa of guinea pigs with TNBS-induced colitis.</a> Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol. 285, 207-216 (2003).</li>
<li>Linden, D. R., Couvrette, J. M., Ciolino, A., McQuoid, C., Blaszyk, H., Sharkey, K. A., Mawe, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Indiscriminate+loss+of+myenteric+neurones+in+the+TNBS-inflamed+guinea-pig+distal+colon%5BTitle%5D)+AND+%22Neurogastroenterol+Motil%22%5BJournal%5D)">Indiscriminate loss of myenteric neurones in the TNBS-inflamed guinea-pig distal colon.</a> Neurogastroenterol Motil. 17, 751-760 (2005).</li>
<li>Lomax, A. E., Mawe, G. M., Sharkey, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Synaptic+facilitation+and+enhanced+neuronal+excitability+in+the+submucosal+plexus+during+experimental+colitis+in+guinea-pig%5BTitle%5D)+AND+%22J+Physiol%22%5BJournal%5D)">Synaptic facilitation and enhanced neuronal excitability in the submucosal plexus during experimental colitis in guinea-pig.</a> J Physiol. 564, 863-875 (2005).</li>
<li>Lomax, A. E., O'Hara, J. R., Hyland, N. P., Mawe, G. M., Sharkey, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Persistent+alterations+to+enteric+neural+signaling+in+the+guinea+pig+colon+following+the+resolution+of+colitis%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Gastrointest+Liver+Physiol%22%5BJournal%5D)">Persistent alterations to enteric neural signaling in the guinea pig colon following the resolution of colitis.</a> Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol. 292, 482-491 (2007).</li>
<li>Strong, D. S., Cornbrooks, C. F., Roberts, J. A., Hoffman, J. M., Sharkey, K. A., Mawe, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Purinergic+neuromuscular+transmission+is+selectively+attenuated+in+ulcerated+regions+of+inflamed+guinea+pig+distal+colon%5BTitle%5D)+AND+%22J+Physiol%22%5BJournal%5D)">Purinergic neuromuscular transmission is selectively attenuated in ulcerated regions of inflamed guinea pig distal colon.</a> J Physiol. 588, 847-859 (2010).</li>
<li>Wade, P. R., Chen, J., Jaffe, B., Kassem, I. S., Blakely, R. D., Gershon, <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Localization+and+function+of+a+5-HT+transporter+in+crypt+epithelia+of+the+gastrointestinal+tract%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Localization and function of a 5-HT transporter in crypt epithelia of the gastrointestinal tract.</a> J Neurosci. 16, 2352-2364 (1996).</li>
<li>Wood, M. J., Hyman, N. H., Mawe, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Effects+of+Daikenchuto+%28DKT%29+on+Propulsive+Motility+in+the+Colon%5BTitle%5D)+AND+%22J+Surg+Res%22%5BJournal%5D)">The Effects of Daikenchuto (DKT) on Propulsive Motility in the Colon.</a> J Surg Res. , (2009).</li>
</ol>

Bu makalede kullanılan alet üreten Catamount Araştırma ve Geliştirme, Inc, bu video üretim sponsor oldu.

Gastrointestinal sistem, sinir aracılı itici motilite bir asır önce ilk defa Bayliss ve Starling (Bayliss ve Starling, 1899) tarafından tarif edilmiştir. Bu gözlem, enterik sinir sistemi (ENS), otonom sinir sisteminin farklı bir bölümü (Langley, 1921) gibi bağırsak sinirler atama yol açtı. Nörojenik bağırsak peristaltizm belirli bir noktaya ve refleks aracılı kasılmaları şeyden önce, ya da sözlü, aboral yönünde uyaran ve rahatlama düzeyine yayma ve / veya mukozal stimülasyonu gerektirir. Sonuç aboral yönde bir sözlü luminal içeriğini propels bir basınç gradiyenti nesil. Türlerin çeşitli ince bağırsak ve kalın bağırsak sıçan, kasılmaların peristaltik dalgalar barsak segmentlerinin lümen içine sıvı infüzyonu tarafından aktif hale getirilebilir. Kobay distal kolonda kolon oral ucunu, doğal ya da yapay fekal pelet eklenecek ve kolon segment boyunca ilerleme kolayca takip edilebilir. Böylece, kobay distal kolon, bağırsak itici motilite araştırmak için basit ve kullanışlı bir çalışma sağlar. Peristaltizm nöroaktif bileşikleri ve reseptörlerin sayısı içeren karmaşık bir sinir refleks. Sonuç olarak, ENS de nörotransmisyon etkileyen bileşikler itici motilite oranını etkilemez. Serotonin, bağırsak mukozasının enterochromaffın hücreleri öncelikle piyasaya peristaltik refleks başlanması yer almaktadır. Itici motilite 4 5-HT reseptör agonistleri (Foxx-Orenstein ve ark, 1998; Grider ve ark, 1998) intralumenal idaresi tarafından geliştirilmiş olduğunu göstermiştir kobay distal kolon, Grider ve arkadaşları kullanarak, uygulama, 5 banyo -HT 3 ve 4, 5-HT reseptör antagonistleri sevk oranı (. Linden ve ark, 2003b. Kadowaki ve ark, 1996) azalır. Ayrıca, serotonin seçici gerialım inhibitörlerinin (SSRI) ile serotonin taşıyıcı inhibisyonu henüz 5-HT reseptörleri (Kadowaki ve ark, 1996, duyarsızlaştırma nedeniyle muhtemelen daha yüksek konsantrasyonlarda peristaltizm, azaltan, düşük konsantrasyonlarda peristaltizm artırır. Wade ve ark , 1996). Kobay itici motilite katkıda bulunan diğer sinyal molekülleri bağırsaklarda internöronal sinyal birincil arabulucu nikotinik reseptörleri, oyunculuk asetilkolin içerir. Sevk oranı (Kadowaki ve ark, 1996) daha az konsantrasyonlarda etkilemez Engelleme nikotinik reseptör antagonisti hexamethonium sinaptik iletim, yüksek konsantrasyonlarda pelet tahrik azalır. Uzun gastrointestinal motilite üzerine inhibitör etkileri olduğu bilinmektedir Opiatlar ve opioid reseptör agonistleri, kobay itici motilite modeli pelet tahrik azaltmak (; Wood ve ark, 2009 Foxx-Orenstein ve ark, 1998). İlginçtir, opioid antagonisti nalokson ile birlikte uygulandığında daikenchuto, kusma, karın ağrısı ve düzensiz motilite tedavisi için klinik olarak kullanılan geleneksel Japon bitkisel ilaç, pelet sevk oranı azalır ve tek başına verildiğinde ters peristaltizm sonuçları (Wood ve ark. 2009). Bu bulgular, çeşitli bileşikler ve bunların reseptörleri kolonik motilite desen katkıları değerlendirmek için kobay itici motilite modeli yararlılığını göstermektedir. Bir dizi çalışmada, inflamasyon kolon nöron (. Linden ve ark, 2003a; Lomax ve ark, 2005) Elektrik ve sinaptik özelliklerinde değişikliklere neden olduğunu göstermiştir ve bu değişiklikler (Kräuter inflamasyon kurtarma aşağıdaki hafta devam edebilir et al, 2007; Lomax ve ark, 2007). Kolit indüklenen nöroplastik değişikliklerin itici motilite Gimm sistemini kullanarak kobay distal kolon etkisi araştırılmıştır. Bu sistem, sadece bir fekal pelet belli bir mesafe yolculuk zamanı ölçmek için itici motilite değerlendirir kolonik motilite, izleme geleneksel yöntem üzerinde birçok avantajı vardır. Gimm sistemi kullanarak daha fazla son araştırmalar, henüz daha ortaya koymuştur; kolonda enflamasyon kaynaklı nöral plastisite Önceki çalışmalarda pelet tahrik (Linden ve ark, 2005 Linden ve ark, 2003a) hızında bir azalma göstermiştir karmaşık değişiklikler (Güçlü ve ark, 2010). Örneğin, ülserli bölgelerde iltihaplı distal kolon pelet sevk oranı azalır, henüz motilite bitişik bölgeler, daha önceki &quot;kronometre&quot; yöntemi tarafından tanınan bir fenomen ivme. Diğer çalışmalarda aktif inflamasyon aşamasında dismotilite COX-2 (Linden ve ark, 2004), henüz ötesinde devam değişmiş motilite inhibe ile restore edilebilir olduğunu göstermiştirinflamasyon çözünürlük COX-2 büyüklüğüne duyarsız (Kräuter ve ark, 2007). Ayrıca, bu daha sonraki çalışmalarda, Gimm sistem tarafından üretilen Spatiotemporal haritalar tahrik azalmış oranları katkıda post-inflamatuar hayvanlarda gözlenmiştir kolonik motilite adım adım bir model ortaya koymuştur. Sonuç olarak, yüksek verim kobay distal kolon itici motilite tahlil kolonik motilite test bileşikleri ve patolojik durumların etkilerini ölçmek anlamına gelir temsil eder, Ayrıca, Gimm sistemi in vitro kolonik itici motilite değerlendirmek için basit ve anlaşılır bir yaklaşım sağlar. Pelet tahrik sürekli ölçümlerin yanı sıra spontan aktivite desen çalışması için Spatiotemporal haritaların üretimi için izin verir. Geleneksel yöntemlerle karşılaştırıldığında, aynı zamanda dijital dosyaları sisteme kaydedilir ve kolayca erişilebilir quantitated ve tekrar analiz birden çok yolu olabilir daha karmaşık bir olgu verebilmesidir.

<table><tbody><tr><td>Krebs&amp;rsquo; Çözeltisi</td><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>İzofluran</td><td>Anestezi</td><td>Webster Veterinary</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Epoksi kaplı fekal pellet</td><td></td><td></td><td></td><td>kurutulmuş ve epoksi (siyah oje) ile kaplanmış doğal kobay pelleti</td></tr><tr><td>Pens</td><td></td><td>Fine Science Tools</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Mikro Makas</td><td></td><td>Fine Science Tools</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Paslanmaz Çelik İğneler</td><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Beherler</td><td></td><td></td><td></td><td>500 mL</td></tr><tr><td>Gaz Tüpü</td><td></td><td></td><td></td><td>95% O&lt;sub&gt;2&lt;/sub&gt;/5% CO&lt;sub&gt;2&lt;/sub&gt;</td></tr><tr><td>Zamanlayıcı</td><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Gastrointestinal Motilite Monitörü</td><td></td><td>Catamount Research and Development</td><td></td><td>&lt;a href=&quot;http://www.catamountresearch.com/products/gimm.htm">http://www.catamountresearch.com/products/gimm.htm&lt;/a&gt;</td></tr></tbody></table>

gastrointestinal motilite monitör (gimm)

Gastrointestinal Motility Monitor (GIMM)

Gastrointestinal Motilite Monitör (Gimm Catamount Araştırma ve Geliştirme; St Albans, VT), in vitro sistemde izole kobay distal kolon segmentlerinde itici motilite izler . Komple bir sistem, bir bilgisayar, video kamera, ışıklı organ banyosu, pompalar dolaşan peristaltik ve ısıtmalı su banyosu, ve veri kaydı ve analiz için özel Gimm yazılım oluşur. Kolonik peristaltizm izleme geleneksel yöntemlerle karşılaştırıldığında, Gimm sistemi motilite sürekli, kantitatif değerlendirme sağlar. Kobay distal kolon ısındı, oksijenli Krebs çözüm yıkandığı ve oral sonuna eklenen fekal pelet yaklaşık 2 mm / sn hızında kolon segment boyunca hareketli. Filmler segment boyunca fekal pelet geçmeden yakalanır ve Gimm yazılım fekal pelet ilerlemeyi izlemek kullanılabilir. Itici motilite oranları tüm segment için veya herhangi bir özel ilgi bölge için elde edilebilir. Bolus indüklenen motilite desen analizine ek olarak, Spatiotemporal haritalar, spontan motor aktivite kalıplarını değerlendirmek için çekilen video segmentleri inşa edilecek. Bu sistem uygulamaları farmakolojik itici motilite reseptör agonistleri ve antagonistleri etkilerinin değerlendirilmesi yanı sıra, enflamasyon ya da stres gibi fizyopatolojik koşullardaki kaynaklanan değişikliklerin değerlendirilmesi. Gimm sistemini kullanarak kobay distal kolon itici motilite testi, öğrenmesi kolay ve basittir ve bu itici motilite değerlendirilmesinde güvenilir ve tekrarlanabilir bir yöntem sağlar.

Gastrointestinal Motilite izleyicisi ile kobay distal kolonda kolonik motilite değerlendirilmesi (Gimm), gastrointestinal sistem itici motilite kantitatif olarak değerlendirmek için öğrenmek için basit ve basit bir yaklaşımdır.

Gastrointestinal Motilite Monitör (Gimm)

Gastrointestinal Motilite Monitörü (GIMM; Catamount Research and Development; St. Albans, VT), propulsif motiliteyi izleyen in vitro bir sistemdir...

Gastrointestinal motilite monitörü, Guinea pig distal kolonunun izole segmentlerinde propulsif motilitenin izlenmesi için basit ve tekrarlanabilir bir yöntem sunar. Bu prosedür, kolonun hayvandan çıkarılması ve ısıtılmış oksijenli Krebs solüsyonu içinde yıkanmasıyla başlar. Ardından, oral uca fekal pelletler yerleştirilir ve kolon segmenti boyunca ilerletilir video.Segment boyunca ilerleyen dışkı peletinin kayıtları alınır ve yazılım dışkı peletinin ilerlemesini takip eder. Propulsif motilite hızlarının analizine ek olarak, spontan motor aktivite paternlerini değerlendirmek için yakalanan video segmentlerinden spatiotemporal haritalar oluşturulabilir. Nihayetinde bu sistem, farmakolojik bileşiklerin propulsif motilite paternleri üzerindeki etkilerini belirlemek ve patofizyolojik durumlardan kaynaklanan değişiklikleri değerlendirmek için kullanılabilir.Gastrointestinal motilite monitörünün, kolon motilitesini izlemeye yönelik geleneksel yöntemlere göre temel avantajı, bu sistemin pellet propulsiyonunun sürekli kantitatif değerlendirmesine olanak tanımasıdır. Ayrıca, belirli bir deneydeki her denemeye ait dijital videolar sisteme kaydedilir ve gerektiğinde yeniden analiz edilebilir. Bu yöntem, reseptör agonistlerinin veya antagonistlerinin pellet propulsiyonu üzerindeki etkilerinin değerlendirilmesi yoluyla çeşitli nörotransmitter sistemlerinin kolon motilitesi üzerindeki rolü gibi GI fizyolojisi alanındaki temel soruların yanıtlanmasına yardımcı olabilir ve stres veya inflamasyon gibi durumların propulsif motilite paternleri üzerindeki etkilerinin incelenmesini sağlayabilir.Gastrointestinal motilite monitörü için distal kolon segmenti hazırlamak amacıyla, izole edilmiş Gine domuzu kolonunu buz üzerine yerleştirin. Kolon daha sonra organ banyosuna yerleştirildiğinde ayırt edilebilmesi için, soğuk Crebs çözeltisi içinde oral uçta küçük bir insizyon yapın. Doku, deneyden önce iki saate kadar buzlu Crebs çözeltisinde bekletilebilir.Bu yaklaşımın sıçan ve fare bağırsaklarında uygulanma girişimleri sınırlı başarıyla sonuçlanmışken, Gine domuzu kolonunda tutarlı sonuçlar elde edilebilmektedir. Deneylere başlamaya hazır olduğunuzda, kolonu organ banyosuna aktarın. Bir sonraki adım genellikle kişiler için en büyük zorluktur.Bu tekniği ilk kez uygulayanlar için, kolon segmenti organ banyosuna sabitlenirken doğru miktarda gerginlik uygulanması kritik önem taşır. Hazırlığın üzerindeki gerginlik derecesi, gerilme reflekslerini aktive ederek motiliteyi etkileyebilmektedir. Bu nedenle, belirli bir deney seti kapsamındaki her deneyde, kolon segmenti aynı araştırmacı tarafından aynı şekilde sabitlenmelidir.Oral ve anal uçların takibini yaparken, distal kolonun her iki ucundan en az beş santimetrelik bir segmenti organ banyosuna iğneleyin ve segmentin orta kısmının bir santimetreye kadar serbestçe hareket edebilmesi için hafif bir gevşeklik bırakın. Kolonu iğneledikten sonra, otomatik takip yazılımına engel olmaması için dış duvardaki kalan kalıntıları temizleyin. Gastrointestinal motilite monitör sistemi; alttan aydınlatmalı bir perfüzyon odası, odanın üzerine yerleştirilmiş bir dijital video kamera, bir bilgisayar ve perisaltik ile ısıtmalı su banyosu sirkülasyon pompalarından oluşur; giriş ve çıkış kanalları organ banyosuna bağlanarak, organ banyosu 37 °C'de önceden ısıtılmış oksijenli Krebs solüsyonu ile 10 mL/dk akış hızında sürekli olarak perfüze edilir.Kolonun, daha önce yapılan insizyonla işaretlenmiş oral ucu araştırmacıya doğru konumlandırılmalıdır. Bu, dışkı peletinin yerleştirilmesini kolaylaştıracaktır. Veri toplama işleminden önce preparatın en az 30 dakika boyunca dengelenmesine izin verin.Normal şartlarda bu süre zarfında doğal peletler dışarı atılacaktır. Gastrointestinal motilite monitörünü veri toplama için hazırlamak için önce ışıklandırma kaynağını açın, ardından özel yazılımı çalıştırın ve uygulama üzerinden yeni bir deney kurulumu yapın. Fekal pelet itme hızı için bir kontrol değeri elde etmek amacıyla, herhangi bir ilaç uygulaması yapılmamış sağlıklı bir hayvandan alınan kolon segmenti ile başlayın.Organ banyosunda dokunun ısıtılması sırasında kolon segmentindeki gerginlik değişebileceğinden, istenen gevşeklik miktarının korunması için segmenti yeniden sabitleyin. Kolon orta kısımdan bir santimetreye kadar serbestçe hareket edebilmelidir, gerektiğinde preparattaki fazla dokuları kesin. Yeni bir deney içindeki denemeye çift tıklayın ve açma-kapama anahtarına tıklayarak kamerayı açın.Epoksi kaplı bir fekal pelletin kolon segmentinin oral ucuna yerleştirilmesiyle başlayın. Peristaltik hareketleri başlatmak için, kayda başlamak üzere bilgisayardaki kayıt düğmesine tıklayın. Pelletin anal yöndeki hareketi video kamera tarafından kaydedilir ve dijital kayıtlar daha sonraki analizler için bilgisayarda saklanır.Pellet kolon segmentinin sonuna ulaştığında, kaydı durdurmak için kayıt anahtarına tıklayın. Her çalışma arasında beş dakikalık bir toparlanma süresi bırakarak, tek bir preparasyonda üç ila beş deneme gerçekleştirin. Belirli koşulların veya ilaçların kolon motilitesi üzerindeki etkilerini belirlemek için, her deneysel koşul için her preparasyonda üç ila beş deneme yapın.Ek olarak, her deneyi en az beş farklı hayvandan alınan en az beş farklı kolon üzerinde gerçekleştirin. Fekal pellet propulsiyon hızı, bir pelletin kolon segmentinin X santimetresini kat etmesi için geçen süre olarak hesaplanır. Sonuçlar, Y ekseninin bir fekal pellet tarafından katedilen mesafeyi milimetre cinsinden, X ekseninin ise süreyi saniye cinsinden temsil ettiği zaman-mesafe grafiklerinde gösterilir; kontrol kolonundan alınan bu örnekte gösterildiği üzere, pellet saniyede yaklaşık iki milimetre hızla doğrusal olarak ilerlemiştir.Elde edilen veriler, daha detaylı analizler için metin dosyaları olarak Excel'e aktarılabilir. Kontrol grubunun aksine, belirli ilaçların uygulanması veya kolondaki inflamasyon, durmuş motilite ve engellenmiş motilite gibi bozulmuş motilite paternlerine yol açabilir. Bireysel denemelerden elde edilen dijital videolar, spontan motor aktivite paternlerini değerlendirmek veya bir dışkı peletinin yatay eksendeki ilerlemesini görsel olarak incelemek amacıyla özel yazılım kullanılarak uzaysal-zamansal haritalara dönüştürülebilir.Her video karesindeki kolon görüntüsü bir siluete dönüştürülüp, tüm uzunluk boyunca çap hesaplanarak gri tonlamaya çevrilerek kolon çapındaki değişiklikler zamana göre grafiğe dökülür. Sonuç olarak, kontrol kolonunun spatiotemporal haritasında gösterildiği gibi, gevşeme bölgelerindeki pelletler siyah, kasılma bölgeleri ise beyaz görünür. Y ekseni, pellet pozisyonunun zaman içindeki değişimini temsil eder.x ekseni, pelletin kolon segmenti boyunca kontrole kıyasla katettiği mesafeyi temsil ederken, bu spatiotemporal haritalar belirli ilaçların uygulanması veya kolondaki enflamasyon nedeniyle durmuş ve engellenmiş motiliteyi göstermektedir. Bu gelişme ile artık sadece tüm segment boyunca hızı belirlemek yerine, kolonun bir segmenti boyunca motiliteyi değerlendirebilir ve aynı preparasyonda spontan aktiviteyi ölçebiliriz. Basit bir protokol eğitiminden sonra, bu teknik yaklaşık iki saat içinde uygulanabilir ve bu prosedürü takiben bir gün içinde birden fazla hayvandan çalışma yürütülebilir.Aynı doku üzerinde elektrofizyolojik kayıtlar gibi diğer in vitro yaklaşımlar da gerçekleştirilebilir.

Research

JoVE Journal

Biology

Biyoloji

Postoperatif ileus (POI) artmış morbidite ve uzamış hastanede kalış yol abdominal cerrahi bir komplikasyonudur. Profilaktik veya terapötik stratejiler yoğunlaştırılmış araştırma yokluğu nedeniyle gereklidir. Bu nedenle İÇN patofizyolojisi araştırmak ve olası tedavi seçenekleri incelemek için bir standart ve uygulanabilir fare modeli kurulmuştur.

Bağırsak Manipülasyon bir Standart Model Analizleri: Kemirgenler Barsak Motilite ve Gut Duvar İnflamasyon İşlevsel Değerlendirilmesi

Laboratuvar hayvanlarının gastrointestinal sistemi boyunca düz kas kasılmalarının in vivo ölçümü, yeterince kullanılmasa da güçlü bir teknik olmaya devam etmektedir. Esnek, çift elemanlı gerinim ölçerler ticari olarak mevcut değildir ve üretim gerektirir. Bu protokol, kemirgenlerde akut veya kronik implantasyon için güvenilir, ucuz gerinim ölçerlerin yapımını açıklar.

Ölçüm Minyatür Çift elemanlı deformasyon ölçüm aletlerinin imalat ve implantasyon<em&gt; In Vivo</em&gt; Kemirgenler Gastrointestinal Kasılmalar.

Son zamanlarda mevcut olan video kaydı ve uzay-zamansal haritalama (STmap) teknikleri, bağırsak hareketliliğinin hem yayılma hem de karıştırma modellerini görselleştirmeyi ve ölçmeyi mümkün kılar. Bu protokolün amacı, GastroIntestinal Motilite İzleme (GIMM) sistemi kullanılarak STmap'lerin oluşturulmasını ve analizini açıklamaktır.

Hareketliliği zamanmekansal Haritalama içinde<em&gt; Ex Vivo</emBağırsakların&gt; Hazırlıklar

Bu makale, yetişkin farelerde kolonik motilitenin nöral regülasyonundaki değişiklikleri tanımlamak için bir video görüntüleme tekniği ve yüksek çözünürlüklü uzay-zamansal haritalamayı açıklamaktadır. Gastrointestinal (GI) fonksiyon üzerindeki ince etkiler, GI hastalığı hakkındaki anlayışımızı ilerletmek için izole doku preparatlarında bu yaklaşım kullanılarak tespit edilebilir.

Video Görüntüleme ve Spatiotemporal Haritalar Fare Gastrointestinal Motilite Analiz

Bu yenilikçi cihaz, kontrollü ortamlarda yürüyüş ve aktivite analizine izin vermek için Magneto-atalet sensörleri kullanır. Şu anda Avrupa Tıp ajansı 'nda bir sonuç ölçümü olarak yeterlilik sürecinde, uygulamalardan biri nöromüsküler hastalıklarda klinik çalışmalarda klinik bir uç olarak hizmet edecek.

Yürüyüş ve aktivite analizi için ev tabanlı monitör

İnce bağırsağın farklı boyutlardaki partikülleri nasıl işlediğini incelemek için, ince bağırsak geçişini belirlemek için yerleşik bir in vivo yöntemi değiştirdik.

Luminal Partiküllerin Murine İnce Bağırsak Mekanosenizasyonunun İncelenmesi

Sıçan bağırsak tüplerini izole etmek ve ilaçların gerginlik, frekans ve amplitüd üzerindeki etkisini in vitro olarak değerlendirmek için bir yöntem sunuyoruz. Bu yöntem, bağırsak tüplerini araştıran araştırmacılar için değerli bir yaklaşım sunmaktadır.

İzole Edilmiş Bağırsak Tüplerinin Fonksiyonel Aktivitelerini Gerçek Zamanlı Olarak Tespit Etmek için İn Vitro Doku Perfüzyon Sistemi Kullanma

Bu protokol, genç RAC1/CED-10 mutant Caenorhabditis elegans'ta niceliksel bir dışkılama testini detaylandırır ve prodromal Parkinson hastalığı evrelerini incelemek için basit bir model sunar. Diğer hayvan modellerinin sınırlamalarını aşar ve erken Parkinson patolojisini hedefleyen terapötik stratejilerin test edilmesini kolaylaştırır.

Caenorhabditis elegans RAC1/CED-10 mutantlarında Gastrointestinal Motilite'nin Erken Parkinson Hastalığını Araştırmak İçin Bir Araç Olarak Değerlendirilmesi

Biz yeni bir agaroz jel tabanlı mikroakışkan cihaz kullanarak nöral kök hücreler (NSC'lerde) motilite epidermal büyüme faktörü reseptörleri (EGFR) aşırı ifade artırdığını göstermektedir. Bu teknoloji, insan sinir kök hücreleri gibi hücre kaynakları kıt olan diğer memeli hücre sistemleri, kolayca adapte olabilir ve zaman etrafında dönüş kritik öneme sahiptir.

Nöral Kök Hücre Motilite değerlendirilmesi Agaroz Jel tabanlı mikroakışkan Cihaz Kullanımı

Havayolu kirpikler hareketliliği ve kirpikler oluşturulan akış fare trakea kullanarak görselleştirme ve ölçülmesi için kolay ve güvenilir bir tekniktir açıklanmıştır. Bu teknik faktörler çok çeşitli farmakolojik ajanlar, genetik faktörler, çevresel maruziyet, ve / veya mukus yük gibi mekanik faktörler de dahil olmak üzere, kirpikler hareketliliği nasıl etkilediğini belirlemek için değiştirilebilir.

Kemirgen Havayolu Epiteli içinde Cilia Motilite Yüksek Çözünürlüklü Görüntüleme için ex vivo Yöntemi

Öğrenin, Gastrointestinal Motilite Monitör ile guinea pig distal kolonunda propulsif motiliteyi nicel olarak değerlendirme yöntemini. Bu teknik, farmakolojik bileşiklerin etkilerini incelemek için kullanılabilir.

Gastrointestinal Motilite Monitör (Gimm)

Daha fazla video keşfet