JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Mikrobiyoloji
0 görüntülenme • 2:29 dk. • January 30th, 2026
Mycobacterium absessus ile enfekte olmuş bir zebrafish embriyosu alın; bu, merkezi sinir sistemini hedef alan ve bakteri ile konak bağışıklık hücreleri içeren apseler oluşturan patojenik bir bakteridir.
Embriyonu buzun üzerinde inkubka ederek immobilize et, ardından kalp ve sinirsel aktiviteyi durdurmak için aşırı doz anestezi ile maruz bırakın ve bu da ölümle sonuçlanır.
Kalan anestezi almak için embriyoyu yıka.
Hücre zarlarını bozmak ve embriyonu lizlemek için bir deterjan çözeltisi ekleyin.
Lizat iğneden kesilerek dokuyu homojenleştirin ve bakterileri serbest bırakın.
Santrifüj yapın, süpernatantı atın ve pelleti bakteriyel topaklanmayı önlemek için yüzeyaktif bir çözeltiye yeniden askıya alın.
Bakteri süspansiyonu seri olarak seyreldin ve agar plakalarına yayın.
Bu ortam, diğer mikropların büyümesini engellemek için antibiyotiklerle desteklenirken, antibiyotik direnci için tasarlanmış Mycobacterium hücreleri çoğalır.
Koloni oluşumunu teşvik etmek için kuluçka, embriyonun bakteri yükünün nicelendirilmesini sağlar.
İstenilen zaman noktasında koloni oluşum birimlerini veya CFU'ları saymak için, enfeksiyon durumunda beş embriyo toplan ve her embriyoyu 1,5 mililitrelik bir mikrosantrifüj tüp
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin