Hücre İçi Bakterilerin Otofaji Aracılı Temizlemesinin In Vitro Araştırılması

Domuz böbreği hücresi kültürlerini alın; bir kültür önceden lizozomal pH'ı artıran ve otofagik-lizozomal bozulmayı engelleyen bir inhibitörle önceden tedavi edilmiş.

Konak-patojen temasını artırmak için patojenik bakteriler ve santrifüj ekleyin.

Bakteriyellerin endositik veziküllere invazisi ve içselleşmesi için kuluçka yapın.

İçselleştirilmiş bakteriler, çoğaltmak için konak besinlerini tüketir ve metabolik stresi tetikler.

Bu stres, otofajiyi aktive eder; burada otofajik bir zar vezikülün etrafında genişleyerek bir otofagozom oluşturur.

Tedavi edilmeyen hücrelerde, otofagozom bakterileri lizozomal bozunma için hedef alır.

İnhibörü ile tedavi edilen hücrelerde, otofajik temizlenme bozulur ve bu da bakteri yüklerinin artmasına yol açar.

Enfeksiyon sonrası hücreleri yıkayın ve ekstraselük bakterileri yok etmek için antibiyotik uygulayın.

Ekstrasellüler matrisi sindirmek ve hücreleri yerinden çıkarmak için bir enzim ekleyin.

Hücreleri mekanik olarak lizize ederek hücre içi bakterileri serbest bırakır.

Lizatları bakteri büyümesi için plaka yapın.

Tedavi edilmemiş hücrelerden daha az koloni sayısı, otofagi-lizozomal bozulma yolunun hücre içi bakterileri temizlemedeki rolünü doğrulamaktadır.