Bakteriyel Biyosensör Kullanılarak İnsan Dışkı Metabolitlerinin Tespiti

Bir ortamda askıya alınmış bakteriyel biyosensör kültürü ile başlayın.

Bu mühendislik yapımı bakteriler, belirli bir fekal metabolite bağlandığında, floresan bir raporlayıcı geniyle ilişkili bir promotor aktifini aktive eden bir transkripsiyon faktörü üretir.

Bu kültüre, konak-mikrobiyom etkileşimlerinde yer alan laktat gibi metabolitleri içeren filtrelenmiş bir insan dışkısı örneği eklenir.

Bu karışımı taze bir ortamla seyrelterek optimal reaksiyon hacmini koruyun.

İnsan bağırsak ortamını taklit etmek için sallamadan kuluçka yapın.

Dışkı metabolitleri bakteriyel hücreye yayılır ve transkripsiyon faktörüne bağlanır.

Bu kompleks, promotora bağlanır ve raporlayıcı gen ifadesi ile protein üretimine yol açar.

Çözeltiyi düzgün dağılım için karıştırın, bir tamponda seyreldin ve akış sitometrisi ile analiz edin.

Bakteri hücreleri lazerden geçerken, raporlayıcı proteinler tarafından yayılan floresans spesifik dışkı metabolitinin varlığını doğrular.